[发明专利]多级分析物检定

说明书

背景技术

已经开发了试验以检测在体内样品中分析物的存在，包括以即时检验(point-of-care)的形式，其允许健康护理从业人员迅速确定患者的病症。这些试验通常涉及抗原-抗体反应或者一些其它配体-配体受体结合事件，并可涉及放射性标记物、酶促标记物、荧光标记物，或者其它可检测标记物。许多这种试验设计成通过以下方法进行定性测定：检测分析物在样品中以指定水平或者浓度或者以高于指定水平或者浓度存在或者不存在。

然而，表明分析物在样品中以可检测浓度或者以高于可检测浓度存在或者不存在的二元试验结果不一定向临床医师、患者，或者进行试验的人员提供最有用的信息。例如，在患者血清中心肌肌钙蛋白(例如，cTnI)(其为心肌损伤的标志)的存在可指示许多病症，或者与许多病症相关，所述病症包括心肌梗塞以及继发性缺血性和非缺血性损伤如冠状动脉介入(coronary intervention)、心肌心包炎、败血病、心脏创伤、化学疗法，和肾衰竭。参见Sharma等人，Cardiac Troponins，J.Clin.Pathol.57:1025-1026(2004)。因此，在血清中心肌肌钙蛋白的存在不一定指示患者正在经历急性心脏事件(例如，心肌梗塞或者MI)。此外，这种水平的不存在不一定排除急性心脏事件(例如MI)，这是因为在这种事件之后历时约4至12小时在血清中肌钙蛋白水平增加。而重要的是测定是否肌钙蛋白水平正在随时间推移以与急性心脏事件一致的方式增加。

能够提供准确的，半定量的，便利的，和具有成本效益的关于样品中的分析物水平的信息(包括心肌损伤的标志)的即时检验试验将极大地满足需要。

发明内容

本发明提供用于检测样品中的分析物的两种或者更多种阈水平的存在的方法和设备。在多个实施方案中，本发明提供用于测定患者病症的便利的即时检验试验，以指导具有成本效益的健康护理。

在一个方面，本发明提供设备，其用于检测患者样品中的心肌损伤或者损害的标志的至少两个阈水平。心肌损伤或者损害的这种标志(其包括心肌肌钙蛋白(例如，cTnT或者cTnI)、肌红蛋白和CK-MB)的增加的水平可指示本申请所述的心肌梗塞和其它急性心脏事件。所述设备可适于即时检验测定，并可由健康护理专业人员或者由未经训练的人员使用，以测定住院治疗或者紧急护理的需要。

根据该方面，所述设备涉及横向流动膜(lateral flow membrane)和结合试剂以在心肌损伤或者损害的标志(“生物标志”)的存在下形成可检测的复合物。所述设备包含样品施用区，和一个或者多个与样品施用区流体连通的流体流动路径。所述流体流动路径包含第一生物标志捕获区和第二生物标志捕获区，其可串联地位于单个流动路径上或者可位于分开的流动路径中。所述第一捕获区设置成可检测地捕获在样品中以第一阈水平或者以高于第一阈水平存在的生物标志，和所述第二捕获区设置成可检测地捕获在样品中以第二阈水平或者以高于第二阈水平存在的生物标志。因此，所述设备提供用于测定或者追踪患者中的生物标志水平的半定量信息，并提供用于以即时检验的形式测定患者病症的多方面信息。

例如，所述设备可含有结合试剂，其用于检测心肌肌钙蛋白如cTnI的至少两个阈水平。在这种实施方案中，所述第一阈水平可指示在血液循环中cTnI的存在，并可对应于约0.04ng/mL并提供更具体的临床评价。例如，高于此阈的cTnI水平表示，应该监测患者的增加的cTnI水平，其指示潜在的心脏事件。所述第二阈水平可指示急性心脏事件，并可对应于在循环中的约0.1ng/mL cTnI。高于所述第二阈水平的cTnI水平指示急性心脏事件，例如MI。在某些实施方案中，所述设备也可提供cTnI的三种或者更多种阈水平的测定，以增强试验的敏感性和/或特异性和/或范围，和/或提供甚至更加具体的临床评价。

一个或多个流体流动路径通常由一个或者多个吸水的(bibulous)，吸收性的，和/或多孔的膜形成，并且每个流动路径可包含对照区，所述对照区产生作为成功样品流动的指示的可检测信号。在一些实施方案中，所述流体流动路径还可包含具有各种孔隙度的膜或者垫以过滤细胞和/或碎片，所述膜或者垫通常接近样品施用区。在这些或者其它实施方案中，所述流体流动路径可包含一个或者多个容纳结合试剂的试剂垫，和/或可在末端包含吸收垫以帮助驱动样品流动。