[发明专利]DPP-4抑制剂

说明书

技术领域

本发明涉及包含2～6个氨基酸的特定序列的肽的二肽基肽酶4抑制剂(以下，只称作DPP-4抑制剂)。

背景技术

糖尿病是引起高血糖、糖尿、体蛋白的解体、酮病、酸中毒等全身性代谢障碍的慢性疾病。通常，糖尿病大致分为以下两种类型：胰腺的β细胞因为某种原因被破坏，调节血糖值的胰岛素枯竭的l型；以及血中虽然存在胰岛素，但胰岛素的作用差，或者来自胰腺的β细胞的胰岛素分泌量减少，其结果，血糖值的调节功能不全的2型。

近年来，作为调节血糖值的激素，身为消化道激素之一的肠促胰岛素受到关注。肠促胰岛素是随着食物的摄取由消化道分泌、并与胰β细胞发生作用以促进胰岛素分泌的激素的总称，已知有葡萄糖依赖性胰岛素分泌刺激多肽(GIP：glucose-dependent insulinotropic polypeptide)和胰高血糖素样肽-1(GLP-1：glucagon-like peptide-1)这两种。分泌的肠促胰岛素与胰腺β细胞表面的受体结合，通过胰岛素分泌促进和胰高血糖素的分泌抑制，显示出降低血糖值的作用。肠促胰岛素的胰岛素分泌促进作用依赖于血中葡萄糖浓度，只有在一定浓度以上的葡萄糖存在下才得以体现。即，通过现有的治疗方法即胰岛素直接给药，出现所担心的低血糖的危险性小，可以期待着安全地纠正饭后高血糖。实际上，已知通过静脉对2型糖尿病患者持续给予作为肠促胰岛素之一的GLP-1，可促进胰岛素分泌，血糖控制得到明显改善，显示出GLP-1补充疗法的有效性。

另一方面，GLP-1被生物体内广泛存在的二肽基肽酶4(EC3.4.14.5，以下只称作DPP-4。)快速分解。因此，作为糖尿病治疗方法，新开发了抑制DPP-4的活性以持续增强内源性GLP-1的作用的药物。需要说明的是，DPP-4虽然在T细胞等免疫系细胞表面作为CD26在细胞膜上表达，但作为可溶性蛋白还存在于血液中，是将GLP-1灭活的丝氨酸蛋白酶。其对从N末端起第2位具有Pro或Ala的生理活性肽具有特异性作用，使二肽从N末端游离出来。

基于这样的DPP-4的作用，有包含从N末端起第2位配列有Pro的3～12个氨基酸的肽的DPP-4抑制剂(专利文献1)。该DPP-4抑制剂是将奶酪悬浮于水性溶剂中，之后除去不溶性物质后得到的水溶性组分中所含的肽，经口摄取混合有该肽的饮品时，在生物体内能够降低血糖值。专利文献1中记载的DPP-4抑制剂是由天然物质得到的，所以毒性低、安全性高。

另外，还有由乳蛋白水解物构成、且刺激GLP-1的分泌、以及具有DPP-4抑制作用的肽(专利文献2)。专利文献2中公开的肽优选2～8个氨基酸的长度、且包含Pro作为第二N末端残基的肽。在实施例中，作为某乳蛋白水解物，评价了500～2000Da的肽组合物的DPP-4抑制效果，但它们的组成或肽序列尚不明确。

而且，还有含有来自饮食用原材料的调制物作为有效成分的DPP-4抑制剂(专利文献3)。该DPP-4抑制剂含有固体浓度为3.5mg/ml以下、DPP-4抑制率为60％以上的来自饮食用原材料的调制物作为有效成分。在专利文献3的实施例中，评价了以绿豆、大豆、胶原蛋白、海藻、茶、核桃、甜茶、石榴、葡萄籽等为来源的肽的DPP-4抑制率。

进一步，还以来自胶原蛋白或明胶的、用Gly-X-Y-(Gly-Z-W)n(式中，n表示0～4的整数，X表示Pro或Leu，Y、Z和W各自独立表示相同或不同的任意的氨基酸残基(其中，Gly除外)。)表示的肽作为DPP-4抑制剂(专利文献4)。在实施例中，通过高效液相色谱法分级市售的胶原蛋白肽，鉴定了DPP-4抑制活性优异的组分的肽序列。

另一方面，作为DPP-4抑制剂的作用，已知其抑制T淋巴球的增殖(非专利文献1)。非专利文献1指出：通过DPP-4抑制剂能够缓和自身免疫性脊椎炎、多发性硬化症、关节炎、风湿病等自身免疫疾病。另外，由于DPP-4与HIV-1对CD4阳性T细胞的感染促进有关，所以还有报道称：通过DPP-4抑制剂和其他药物的联用，可以期待防御HIV-1的感染(非专利文献2)。而且，还有报道称：由于皮肤细胞表达DPP-4，所以DPP-4抑制剂对皮脂腺细胞或表皮细胞的增殖或分化或细胞因子的产生有影响(非专利文献3)。使用DPP-4抑制剂抑制被痤疮丙酸杆菌刺激的T淋巴细胞的增殖，引起成纤维细胞的TGFβ的表达抑制、增殖抑制、基质产生抑制，其结果暗示：使用DPP-4抑制剂，能够治疗青春痘、干癣、瘢痕疙瘩。

现有技术文献

专利文献