[发明专利]液体酶制剂及其制备方法

说明书

发明领域

本发明涉及液体酶制剂，特别涉及液体的且稳定的制剂，其包含交联酶和/或酶修饰乳蛋白质。本发明特别涉及液体的且稳定的转谷氨酰胺酶制剂。此外，本发明涉及用于制备液体酶制剂的方法。

发明背景

包含交联酶和/或酶修饰乳蛋白，如漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶、巯基氧化酶或葡萄糖氧化酶的酶制剂是均可以通过商业途径在粉末制剂和液体制剂中获得。然而，转谷氨酰胺酶和蛋白谷氨酰胺酶产品目前在市场上仅为粉末形式。粉末酶产品的使用并不被完全接受，这是由于所有生产工厂中存在粉尘形成。因粉尘引起的健康危害尤其已经在工人中引起了担忧。

来自茂原链轮丝菌(Streptoverticillium mobaraense)菌株的转谷氨酰胺酶及其制备方法已经公开于欧洲专利号0379606B1中。此外，使用从利迪链霉菌(Streptomyces lydicus)菌株分离的基因产生转谷氨酰胺酶的方法公开于欧洲专利号0777726B1中。

与配制酶(如液体形式的转谷氨酰胺酶)相关的问题之一是制剂稳定性的缺乏。此外，与本液体酶制剂相关的缺点之一是它们含有至少一种防腐剂。

发明简述

本发明的目标因此是提供包含转谷氨酰胺酶和/或另一乳蛋白交联和/或修饰酶，如漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶、巯基氧化酶、葡萄糖氧化酶或蛋白谷氨酰胺酶的液体酶制剂，其是稳定的且可以在室温或冰箱和/或冷库温度下储存商业制剂所需的时间期限。

本发明的另一目标是提供包含转谷氨酰胺酶的液体制剂，其是稳定的且可以在室温或冰箱和/或冷库温度下储存商业制剂所需的时间期限。

本发明的其他目标是提供用于制备稳定的液体酶制剂的方法，所述酶制剂包含转谷氨酰胺酶和/或另一乳蛋白交联和/或修饰酶。

本发明的甚至其他目标是提供用于制备稳定的液体制剂的方法，所述液体制剂包含转谷氨酰胺酶。

通过独立权利要求中给出的制剂和方法完成本发明的目标。本发明的优选实施方案描述于从属权利要求中。

本发明的其他目标、细节和优点将从以下详细说明和实施例中变得显而易见。

发明详述

乳蛋白交联和/或修饰酶，如转谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶、巯基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶催化乳蛋白的修饰。这些酶的作用之间，进一步与葡萄糖氧化酶的作用之间看起来存在协同作用。不受任何理论的束缚，葡萄糖氧化酶和/或过氧化物酶看起来催化这样的反应，其中通过过氧化氢的形成释放氧气。氧气然后可以催化(氧化)酪氨酸酶的交联。

乳蛋白交联和/或修饰酶，如转谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶、巯基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶任选地与葡萄糖氧化酶一起用于加工鱼、肉和蛋产品、浆料和pates、水果、浆果和蔬菜、豆制品、谷物制品、面包和烘焙产品的制造。

以下乳蛋白交联和/或修饰酶在乳制品或其他食品范畴内的食品加工中是全部相关的。

转谷氨酰胺酶是催化蛋白质分子中存在的谷氨酰胺与赖氨酸氨基酸残基之间产生共价键的酶家族(EC2.3.2.13)。当形成键时，会释放氨。

来源于真菌和细菌，如真菌白腐菌(Trametes hirsute)的漆酶(EC1.10.3.2)催化碳水化合物与蛋白质之间的交联(氧化芳族化合物和半胱氨酸)，其在食品加工中具有应用，例如用于减少变应原性。

酪氨酸酶(EC1.14.18.1)是催化酚类，如酪氨酸氧化的酶，其在食品加工中具有应用，例如用于减少变应原性。

过氧化物酶(EC1.11.1.7)是催化芳族化合物氧化的酶家族，其在食品加工中具有应用，例如用于减少变应原性。

巯基氧化酶(EC1.8.3.3)催化二硫键的形成、谷胱甘肽的氧化。

蛋白谷氨酰胺酶催化蛋白质结合的谷氨酰胺的脱酰胺作用，并将谷氨酰胺转化成谷氨酸。

葡萄糖氧化酶催化蛋白质交联的形成和戊聚糖的氧化胶凝。

乳蛋白交联和/或修饰酶，如转谷氨酰胺酶、漆酶、酪氨酸酶、过氧化物酶、巯基氧化酶和蛋白谷氨酰胺酶用于乳制品工业，以稳定基于乳的产品结构。除了乳制品工业，这些酶用于加工鱼、肉和蛋产品、浆料和pates、水果、浆果和蔬菜、豆制品、谷物制品、面包和烘焙产品的制造。因此，液体酶制剂适合于例如乳制品、加工鱼、肉、蛋、浆料和pates、水果、浆果和蔬菜、大豆、谷物、面包和烘焙产品的制造。尤其在工业规模的制造中，液体酶制剂的使用比粉末制剂的使用会更实际且更有利。