[发明专利]用于降解有机磷酸酯的酶有效
申请号: | 201280045762.2 | 申请日: | 2012-07-20 |
公开(公告)号: | CN103814127B | 公开(公告)日: | 2017-02-08 |
发明(设计)人: | C·斯科特;J·奥克肖特;R·拉塞尔;N·弗伦克;S·科措尼斯;刘凯燕 | 申请(专利权)人: | 联邦科学工业研究组织 |
主分类号: | C12N9/14 | 分类号: | C12N9/14;C07K14/195;C12N15/55;A61K38/46;C07K19/00;C07K17/00;C12N15/29;B09C1/10;C12Q1/34 |
代理公司: | 北京戈程知识产权代理有限公司11314 | 代理人: | 程伟 |
地址: | 澳大利亚*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 降解 有机 磷酸酯 | ||
1.一种多肽,其含有序列如下的氨基酸:
i)如SEQ ID NO:1所示,
ii)与如SEQ ID NO:1所示的序列至少95%相同,或
iii)i)或ii)的片段,其具有有机磷酸酯水解活性和/或至少270个氨基酸长,
其中,所述多肽包含下列中的一种或更多或全部;
a)在与SEQ ID NO:1的氨基酸51位相对应位置上的缬氨酸;
b)在与SEQ ID NO:1的氨基酸63位相对应位置上的丙氨酸;
c)在与SEQ ID NO:1的氨基酸156位相对应位置上的精氨酸;
d)在与SEQ ID NO:1的氨基酸203位相对应位置上的谷氨酸;以及
e)在与SEQ ID NO:1的氨基酸236位相对应位置上的天冬氨酸。
2.根据权利要求1所述的多肽,其具有有机磷酸酯水解活性。
3.根据权利要求2所述的多肽,其与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的第二多肽相比具有更强的有机磷酸酯水解活性。
4.根据权利要求2或权利要求3所述的多肽,其具有下列中的两种或更多或全部:
i)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对甲基毒死蜱高至少2倍的二级速率常数(kcat/Km),
ii)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对二嗪农高至少1.5倍的二级速率常数(kcat/Km),
iii)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对乙基对硫磷高至少2倍的二级速率常数(kcat/Km),或者
iv)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对乙基毒死蜱高至少1.2倍的催化常数(kcat)。
5.根据权利要求4所述的多肽,其具有:
i)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对甲基毒死蜱高至少2倍的二级速率常数(kcat/Km),
ii)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对二嗪农高至少1.5倍的二级速率常数(kcat/Km),
iii)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对乙基对硫磷高至少2倍的二级速率常数(kcat/Km),和
iv)与氨基酸序列选自SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的多肽相比,针对乙基毒死蜱高至少1.2倍的催化常数(kcat)。
6.根据权利要求2至5的任一项所述的多肽,其中所述有机磷酸酯的离去基团具有低于8的pKa。
7.根据权利要求2至6的任一项所述的多肽,其中所述有机磷酸酯是芳香族非乙烯基有机磷酸酯。
8.根据权利要求6或权利要求7所述的多肽,其中所述有机磷酸酯是乙基对硫磷、甲基对硫磷、二嗪农、乙基毒死蜱、甲基毒死蜱或马拉硫磷。
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