[发明专利]标定试剂和方法

权利要求书

1. 用于标定多重测定的方法，包括：

将标定试剂加入到其上已固定多种捕获剂的固相，

加入具有结合到所述标定试剂的能力的检测分子，

检测结合的检测分子，

从而建立包含许多标定点/间隔的标定曲线，

其特征在于，所述标定试剂包含至少2种不同的结合分子，其中每种结合分子具有特异性结合到固定在固相上的捕获剂的能力和结合到检测分子的能力，并且其中至少2种结合分子在标定试剂中以不同浓度存在，从而代表标定曲线中的不同的标定点/间隔。

2. 权利要求1的方法，其中所述结合分子是重组抗体、天然抗体例如自身抗体、或肽/蛋白生物标志物例如抗原性生物标志物。

3. 权利要求1或2的方法，其中所述结合分子是嵌合抗体，例如包含变应原-特异性单克隆小鼠IgG的重链可变结构域和人IgE重链的小鼠-人嵌合抗体。

4. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述多种捕获剂是至少5种不同的捕获剂，例如至少10种、至少50种或至少100种不同的捕获剂。

5. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述捕获剂是：变应原组分，例如天然或重组变应原组分；或疾病-相关抗原，例如感染性疾病或自身免疫性疾病相关的抗原性组分；或对肽/蛋白生物标志物具有特异性的抗体。

6. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述检测分子是抗免疫球蛋白缀合物，例如抗人IgE缀合物或抗人IgG缀合物，或是对肽/蛋白生物标志物具有特异性的抗体。

7. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述标定试剂包含至少5种、例如至少10种、例如至少15种不同的结合分子。

8. 权利要求7的方法，其中所述标定试剂包含至少5种、例如至少10种、例如至少15种不同的嵌合IgE抗体，其中每种嵌合抗体具有特异性结合到选自以下的变应原组分的能力：Bet v 1、Der p 2、Ole e 1、Gal d 1、Art v 1、Fel d 1、Phl p 1、Amb a 1、Can f 1、Der p 1、Gal d 2、Can f 2、Can f 5、Phl p 5和Pru p 3。

9. 前述权利要求中任一项的方法，其中所述多重测定在微阵列芯片上进行。

10. 多重测定系统，用于检测存在于生物样品中的目标分子，例如(a)免疫球蛋白或(b)肽/蛋白生物标志物，所述系统包括：

- 反应容器，

- 固定在固相上的多种捕获剂，

- 检测分子，例如(a)抗免疫球蛋白检测分子或(b)结合到肽/蛋白生物标志物的检测分子，

- 标定试剂，

- 反应缓冲介质，

其特征在于，所述标定试剂包含至少2种不同的结合分子，其中每种结合分子具有特异性结合到固定在固相上的捕获剂的能力和结合到检测分子上的能力，并且其中至少2种结合分子在标定试剂中以不同浓度存在。

11. 权利要求10的系统，其中所述目标分子是(i) IgE抗体或(ii) IgG抗体，或(iii) 疾病的肽/蛋白生物标志物。

12. 权利要求10或11中任一项的系统，其中所述检测分子是(i)抗人IgE缀合物，(ii)抗人IgG缀合物，或(iii)对肽/蛋白生物标志物具有特异性的抗体。

13. 权利要求10-12中任一项的系统，其中所述结合分子是重组抗体例如嵌合抗体、天然抗体例如自身抗体、或肽/蛋白生物标志物。

14. 权利要求10-13中任一项的系统，其中所述捕获剂是：变应原组分，例如天然或重组变应原组分；或疾病-相关抗原；例如感染性疾病相关的抗原性组分，或自身免疫性疾病相关的抗原性组分；或对肽/蛋白生物标志物具有特异性的抗体。

15. 权利要求10-14中任一项的系统，其中所述标定试剂包含15种不同的小鼠-人嵌合IgE抗体，其中每种嵌合抗体具有特异性结合到选自以下的变应原组分的能力：Bet v 1、Der p 2、Ole e 1、Gal d 1、Art v 1、Fel d 1、Phl p 1、Amb a 1、Can f 1、Der p 1、Gal d 2、Can f 2、Can f 5、Phl p 5和Pru p 3。