[发明专利]使用适用于具有低容积传氧系数KLa的发酵罐的丝状真菌用于生产纤维素酶的方法

权利要求书

1.生产纤维素酶的方法，其在搅拌、通气的生物反应器中使用属于丝状真菌的菌株，包括至少两个步骤：

·   第一生长步骤，在分批阶段在至少一种碳质生长底物的存在下，使用在10-60g/L的范围内的碳质生长底物浓度进行；

·   生长和酶生产的第二步骤，在至少一种诱导物碳质底物的存在下，在分批补料阶段存在以50-140mg/克细胞生物量/小时范围内的限制的碳源流。

2.根据权利要求1的方法，其中所述碳质生长底物的浓度在10-20g/L的范围内。

3.根据权利要求2的方法，其中所述碳质底物的浓度在12-17g/L的范围内。

4.根据前述权利要求之一的方法，其中所述碳源流是在70-100mg/克细胞生物量/小时范围内。

5.根据权利要求4的方法，其中所述碳源流是在80-90mg/克细胞生物量/小时范围内。

6.根据前述权利要求之一的方法，其中所述生物反应器具有在40-180h^-1范围内的容积传氧系数K_La。

7.根据前述权利要求之一的方法，其中所述生物反应器具有在40-150h^-1范围内的容积传氧系数K_La。

8.根据前述权利要求之一的方法，其中所述碳质生长底物选自乳糖、葡萄糖、木糖、纤维素生物量的酶水解产物的单糖的乙醇发酵后所得残留物和/或衍生自纤维素生物量的预处理的水溶性戊糖的粗提取物。

9.根据前述权利要求之一的方法，其中所述诱导物碳质底物是乳糖、纤维二糖、槐糖、纤维素生物量的酶水解产物的单糖的乙醇发酵后所得残留物和/或衍生自纤维素生物量的预处理的水溶性戊糖的粗提取物。

10.根据前述权利要求之一的方法，其中选择用于生产生物量的碳质生长底物在灭菌前导入发酵罐。

11.根据权利要求1-9之一的方法，其中选择用于生产生物量的碳质生长底物分开灭菌并在灭菌后导入生物反应器。

12.根据前述权利要求之一的方法，其中在补料分批阶段导入的诱导物碳质底物在导入反应器之前独立地灭菌。

13.根据前述权利要求之一的方法，其中所使用的菌株是里氏木酶（Trichoderma reesei）菌株。

14.根据前述权利要求之一的方法，其中所使用的菌株是通过基因突变、选择或重组的里氏木酶菌株。