[发明专利]人源化免疫调节单克隆抗体的变体

说明书

发明领域

本发明涉及免疫治疗领域且更具体地涉及用于多种适应症的治疗、特别是在癌症和免疫缺陷疾患的治疗中有用的人源化单克隆抗体。

发明背景

最近几年中，关于免疫调节、特别是在T细胞应答水平的分子和细胞基础的快速增长的了解，提供了包括抗肿瘤疫苗的研发的免疫治疗方法的新的武器（arsenal）。某些单克隆抗体显示具有免疫调节活性，包括结合T细胞的表面的决定簇和诱导这些细胞的增殖、活化、成熟或分化的能力。

BAT（也称为mBAT-1或BAT-1）是针对Burkitt淋巴瘤细胞系（Daudi）的膜制备物产生的显示呈现针对多种类型的肿瘤的抗肿瘤和免疫刺激效果的鼠（murine）单克隆抗体（Hardy等人，2001,Int.J.Oncol.19:897）。该单克隆抗体最初在Hardy等人的美国专利号5,897,862中被公开。BAT-1由具有CNCM登录号I-1397的杂交瘤细胞系分泌。还体外研究了鼠BAT的免疫调节作用。鼠BAT活化CD4+T细胞并诱导IFN-γ从这些细胞的分泌（Hardy等人，2000,Int.Immunol.12:1623和Quaglino E.等人，2005,Vaccine9:23(25):3280-7）。另外，发现BAT触发T细胞的增殖并增加它们的细胞溶解活性（Hardy,B.等人，1997,Hum.Antibodies,8:95）。

在Hardy等人的WO00/58363和美国专利号7,695,715中公开了鼠BAT的多核苷酸和氨基酸序列。

基于鼠BAT的一些人源化单克隆抗体（mAb）在美国专利号7,332,582中被公开，其内容通过引用并入本文。在美国7,332,582的特定实施方案中，人源化单克隆抗体包含选自SEQ ID NO:1-4的轻链可变区（分别表示为BATRK_D、BATRK_A、BATRK_B和BATRK_C）和选自SEQ ID NO:5-9的重链可变区（分别表示为BATRH_C、BATRH_A、BATRH_B、BATRH_D和BATRH_E）。在本文以下的表1中描绘轻链和重链抗体变体的氨基酸序列。用灰色背景描绘所述可变区中不同的残基（轻链区的位置2、30、69、77、97和98和重链的位置35、69、70和71）。

根据美国7,332,582，人源化单克隆BAT抗体呈现诱导大于由亲本鼠BAT抗体诱导的抗肿瘤作用的抗肿瘤作用。在检测的多种模式系统中，在SCID（严重联合免疫缺陷型疾病）小鼠、NK细胞缺陷的浅褐色小鼠和T细胞缺陷的裸鼠（nude mice）中研究了BAT抗肿瘤活性（Hardy,B.,1997,Proc.Natl.Acad.Sci.USA94:5756）。用随后在肺中形成肿瘤的鼠B16黑色素瘤细胞静脉注射所有小鼠。BAT抗体仅在用鼠或人淋巴细胞移植的SCID小鼠中发挥抗肿瘤作用。在无胸腺裸鼠和浅褐色小鼠中BAT抗体发挥抗肿瘤活性，尽管与BAT抗体在野生型小鼠中的抗肿瘤活性相比，该活性的效果更低。

应该牢牢记住的是BAT抗体不是预期靶向肿瘤细胞本身而是靶向受试者或患者的免疫功能细胞，以便以有益的方式调节免疫应答。

Berger等人（2008）公开了向患有晚期血液系统恶性肿瘤的患者施用基于mBAT-1的人源化单克隆抗体CT-011和相关的药代动力学（Berger等人，Clin.Cancer Res.2008;14(10)2008年5月15日）。

WO09/101611涉及用于抑制肿瘤生长、增加患有肿瘤的受试者的存活并针对哺乳动物中肿瘤复发诱导保护的方法，包括施用包含源自指定为mBAT-1的鼠单克隆抗体的CDR区的人源化单克隆抗体与至少一种化疗剂的组合。

在任何地方的背景技术中都没有教导或表明，使用包含至少一个位点特异性的氨基酸修饰的人源化mBAT-1单克隆抗体将对多种适应症的治疗、特别是在癌症和免疫缺陷相关的疾病和疾患的治疗中是有益的。

发明概述