[发明专利]细胞培养方法

权利要求书

1.一种生产重组多肽群的方法，该方法包括：

提供一种重组多肽的C端变体的目标值，

提供包括编码该重组多肽的核酸的一种宿主细胞，

在以下条件下培养该宿主细胞(i)其中该细胞表达该编码的重组多肽的C端变体群并且(ii)增加该细胞的胞内pH，并且

分离该群，其中该群包括该重组多肽的C端变体的提供的目标值。

2.如权利要求1所述的方法，其中增加该细胞的细胞内pH的条件包括在一种培养基中培养这些细胞，该培养基包括以下各项中的一个或多个：(a)至少大约2g/L的赖氨酸、精氨酸或组氨酸；(b)大约0.5g/L的葡萄糖至大约2g/L的葡萄糖；(c)大约2mM至大约10mM的NH₄Cl；(d)大约10μM至大约500μM氯喹；以及(e)大约10mM至大约30mM谷氨酰胺。

3.一种生产含Fc多肽群的方法，该方法包括：

提供一种含Fc多肽的K0、K1、和/或K2赖氨酸变体的目标值；

提供包括编码该含Fc多肽的核酸的一种宿主细胞；

在以下条件下培养该宿主细胞(i)其中该细胞表达该编码的含Fc多肽的K0、K1、和/或K2的赖氨酸变体群以及(ii)增加该细胞的胞内pH；并且

分离该群，其中该群包括该含Fc多肽的K0、K1、和/或K2赖氨酸变体的提供的目标值。

4.如权利要求3所述的方法，其中增加该细胞的细胞内pH的条件包括在一种培养基中培养这些细胞，该培养基包括以下各项中的一个或多个：(a)至少大约2g/L的赖氨酸、精氨酸或组氨酸；(b)大约0.5g/L葡萄糖至大约2g/L葡萄糖；(c)大约2mM至大约10mM的NH₄Cl；(d)大约10μM至大约500μM氯喹；以及(e)大约10mM至大约30mM谷氨酰胺。

5.一种生产抗体群的方法，该方法包括：

提供一种抗体的K0、K1、和/或K2赖氨酸变体的目标值；

提供包括编码该抗体的核酸的一种宿主细胞；

在以下条件下培养该宿主细胞(i)其中该细胞表达该编码的抗体的K0、K1、和/或K2赖氨酸变体群以及(ii)增加该细胞的胞内pH；并且

分离该群，其中该群包括该抗体的K0、K1、和/或K2赖氨酸变体的提供的目标值。

6.如权利要求5所述的方法，其中增加该细胞的细胞内pH的条件包括在一种培养基中培养这些细胞，该培养基包括以下各项中的一个或多个：(a)至少大约2g/L的赖氨酸、精氨酸或组氨酸；(b)大约0.5g/L葡萄糖至大约2g/L葡萄糖；(c)大约2mM至大约10mM的NH₄Cl；(d)大约10μM至大约500μM氯喹；以及(e)大约10mM至大约30mM谷氨酰胺。

7.一种生产重组抗体群的方法，该方法包括：

提供一种重组抗体的C端变体的目标值，

提供包括编码该重组抗体的核酸的一种宿主细胞，

在包括至少大约2g/L赖氨酸、精氨酸或组氨酸的培养基中，在其中该细胞表达该编码的重组抗体的C端变体群的条件下培养该宿主细胞；并且

分离该群，其中该群包括该重组抗体的C端变体的提供的目标值。

8.一种生产重组抗体群的方法，该方法包括：

提供一种重组抗体的C端变体的目标值，

提供包括编码该重组抗体的核酸的一种宿主细胞，

在包括大约0.5g/L葡萄糖至大约2g/L葡萄糖的培养基中，在其中该细胞表达该编码的重组抗体的C端变体群的条件下培养该宿主细胞；并且

分离该群，其中该群包括该重组抗体的C端变体的提供的目标值。

9.一种生产重组抗体群的方法，该方法包括：

提供一种重组抗体的C端变体的目标值，

提供包括编码该重组抗体的核酸的一种宿主细胞，

在包括大约5mM至大约10mM NH₄Cl的培养基中，在其中该细胞表达该编码的重组抗体的C端变体群的条件下培养该宿主细胞；并且

分离该群，其中该群包括该重组抗体的C端变体的提供的目标值。