[发明专利]DNA疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及DNA疫苗，其对于生活方式相关疾病例如高血压等的治疗或预防有效。

背景技术

已有报道称，在美国，只有35%的高血压患者能够适当地控制血压。高血压治疗的成果如此之差的主要原因之一是患者不服从(即，不依从)医生的指示。作为能够解决不依从问题的疗法，用于高血压的疫苗引起了关注(非专利文献1)。

用于高血压的疫苗是用于高血压的治疗方法，其包括给高血压患者施用高血压的恶化因子、包含在所述恶化因子中的表位、或编码它们的表达载体，以在所述高血压患者体内诱导针对所述恶化因子的抗体，从而中和所述恶化因子的功能并减轻高血压的症状。建议以包括肾素、血管紧张素II和AT-1受体在内的各种因子作为疫苗的目标(非专利文献1)。

然而，通常已经建立了对于因子例如肾素、血管紧张素II和AT-1受体等的免疫耐受，因为这些因子是患者自身的成分。因此，甚至在将这些因子或其部分肽向患者直接施用时，也难以在所述患者体内诱导针对所述因子的抗体。因而，需要一些技术构思以使患者的免疫系统识别这些自体抗原，从而诱导产生针对这些自体抗原的抗体。

乙型肝炎病毒核心(HBc)抗原蛋白通过自组装构成球形核心颗粒。所述核心颗粒具有非常高的免疫原性。在使用通过将期望的表位插入到HBc抗原蛋白的具体位点，或将期望的表位连接到HBc抗原蛋白的末端而获得的融合多肽时，所述表位递呈在通过自组装形成的颗粒的表面上。使用融合多肽，所插入的表位容易被免疫系统识别，并且能够有效地诱导产生识别所述表位的抗体。因此，使用HBc抗原蛋白作为疫苗的平台，已尝试诱导产生抗体，即便抗原难以被免疫系统识别(非专利文献2、非专利文献3)。

专利文献1公开了由嵌合HBc抗原蛋白构成的颗粒，所述嵌合HBc抗原蛋白包含具有表位的外来氨基酸序列，其中所述外来氨基酸序列插入在HBc抗原的氨基酸残基80-81之间。

专利文献2和非专利文献4公开了包含血管紧张素II的部分肽、间隔区和病毒样颗粒(VLP)的复合物，其中所述血管紧张素II的部分肽通过所述间隔区连接到VLP。描述了所述复合物作为用于高血压的疫苗是有效的。

专利文献3公开了通过将胆固醇酯转运蛋白(CETP)免疫原插入到乙型肝炎核心蛋白的具体区域而获得的免疫原性多肽。

非专利文献5公开了使用DNA疫苗的肌内免疫在兔动脉硬化模型中抑制动脉硬化，其中所述DNA疫苗编码通过乙型肝炎病毒核心(HBc)抗原蛋白展示的，由26个氨基酸组成的胆固醇酯转运蛋白(CETP)的表位，并且包含CpG DNA。此DNA疫苗经设计以允许将CETP表位插入在HBc抗原蛋白的氨基酸残基80-81之间。

非专利文献6公开了插入在乙型肝炎病毒核心(HBc)抗原蛋白中的异源表位的位置决定了其免疫原性。该文献公开了在乙型肝炎病毒核心(HBc)抗原蛋白的氨基酸残基75-81之间插入表位，导致对插入表位的抗体滴度增加，且对HBc的抗体滴度下降。

非专利文献7公开了经设计允许将疟疾CS蛋白重复表位插入在乙型肝炎病毒核心(HBc)抗原蛋白的氨基酸残基75-81之间的杂合HBcAb-CS颗粒，在小鼠中防止疟疾感染。

为了加强免疫作用，已提出向疫苗添加作为佐剂的免疫刺激序列(ISS)，或将ISS插入到活性成分的表达载体中(非专利文献8)。

然而，用于生活方式相关疾病例如高血压等的疫苗的功效不足以令人满意。

[文献列表]

[专利文献]

专利文献1：JP-B-3228737

专利文献2：WO2003/031466

专利文献3：WO99/15655

[非专利文献]

非专利文献1：T. H. Do等，Expert Opin. Biol. Ther., vol.10, no.7, pp.1077-1087, 2010

非专利文献2：D. C. Whitacre等，Expert Rev. Vaccines, vol.8, no.11, pp.1565-1573, 2009

非专利文献3：B. E. Clarke等，Nature, vol.330, pp.381-384, 1987

非专利文献4：P. M. Ambuhl等，Journal of Hypertension, vol.25, no.1, pp.63-72, 2007