[发明专利]抗CD40抗体及其用途

说明书

关于联邦资助研究的声明

本发明在美国国立过敏和传染病研究所、美国国立卫生研究院提供的合同HHSN272200900037C的美国政府支持下完成。政府对本专利具有某些权利。

发明背景

本发明涉及抗CD40抗体和所述抗体的用途，例如，降低移植排斥的可能性、或增加移植排斥之前的持续时间，诱导免疫抑制或治疗自身免疫性病症。

免疫系统、特别是体液免疫系统的抑制在器官移植和自身免疫性病症的治疗中是有益的。例如，器官移植已成为涉及器官损害的多种形式的危及生命的疾病的优选治疗方法。当接受移植的细胞或组织的生物体产生对该组织的不期望的免疫应答时，发生移植排斥。组织型匹配可以最大限度地减少移植排斥，但是甚至匹配的组织通常受供体排斥。因此，对于几乎所有组织移植的情况，都需要免疫抑制治疗。

已经实现了临床移植的改善结果，这主要通过开发日益强大的非特异性免疫抑制药物来抑制排斥反应。尽管短期结果已经改善，但是长期结果仍然不足。需要长期免疫抑制剂来抗击移植器官的慢性排斥，并且这些药剂的使用极大地增加了心血管疾病、感染和恶性肿瘤的风险。

用于减少移植排斥的一个潜在目标是CD40/CD154相互作用。CD40在B淋巴细胞表面上表达，而CD154在T细胞表面上表达。这两种蛋白之间的相互作用与B细胞活化相关，所述B细胞活化触发细胞因子表达，以及细胞表面标志物包括CD23、CD80和CD86的表达。已经显示使用抗CD154抗体阻断该相互作用以减少或消除非人灵长类动物中移植组织的排斥。

对于任何类型的免疫抑制(例如，在移植程序中)，效力和毒性之间的平衡对于其临床接受性而言是一个关键因素。因此，存在对于特异性靶向参与(例如)移植排斥和自身免疫性病症的免疫途径的疗法的需求。

发明概述

在第一方面，本发明的特征在于分离的抗体或其抗原结合片段(例如，缺乏Fc部分或者是F(ab’)₂、Fab、Fv或scFv结构的抗体)，其特异性结合CD40(例如，猕猴、鼠或人CD40)上存在的表位，其中该表位被2C10抗体所识别(例如，其中所述表位不被3A8或Chi220抗体或两者所识别)。该抗体在体外能够阻断表达CD154的Jurkat细胞对B淋巴细胞(例如，猕猴或人B淋巴细胞)的活化，或者在体外能够抑制猕猴B细胞，例如，降低CD23、CD80或CD86表达。该抗体可以是2C10抗体。该抗体可以具有人恒定区。在某些实施方案中，该抗体是人源化抗体或人抗体。在某些实施方案中，该抗体可以是单克隆抗体或多克隆抗体。

在具体实施方案中，该抗体包括由SEQ ID NO:2的氨基酸20-132定义的重链可变区，其抗体结合部分或片段，或其人源化形式。在其他实施方案中，抗体的抗体轻链可变区包括SEQ ID NO:4的23-128的序列，其抗体结合部分或片段，或其人源化形式。在其他实施方案中，抗体的重链可变区包括SEQ ID NO:2的氨基酸20-132，并且抗体的轻链可变序列包括SEQ ID NO:4的氨基酸23-128。

本发明的特征还在于编码第一方面的抗体或抗体片段的多核苷酸，包括该多核苷酸的载体，和包括该载体的细胞。该细胞可以是真核细胞(例如，哺乳动物诸如人、小鼠、猴或兔细胞)，或者可以是原核细胞(例如，细菌细胞诸如大肠杆菌细胞)。

在另一个方面，本发明的特征在于抑制受试者(例如，哺乳动物诸如人)的免疫系统的方法。该方法包括给受试者施用有效量的第一方面的抗体或其抗原结合片段。

在又另一个方面，本发明的特征在于在需要其的受试者(例如，哺乳动物诸如人)中治疗或预防性治疗移植排斥或增加发生移植排斥之前的持续时间的方法。该方法包括给受试者施用有效量的第一方面的抗体或其抗原结合片段。

在前述两个方面的任一个中，受试者可能已经接受，或者可能需要，器官移植(例如，心脏、肾、肺、肝脏、胰腺、肠、和胸腺、或其部分)或组织移植(例如，骨、肌腱、角膜、皮肤、心脏瓣膜、静脉、或骨髓)。

在前述两个方面的任一个中，可以在移植(transplantation)或嫁接(graft)之前开始施用。施用可以在移植(transplantation)或嫁接(graft)之后继续至少1、2、3、4、5、7 或10天；2、3、4、6、8、10、或12周；3、4、5、6、8、10、12、24、或36个月。