[发明专利]使用凝胶渗透色谱法纯化病毒的方法

权利要求书

1.一种纯化病毒的方法，其包括：

使凝胶渗透色谱柱与包含病毒和液体载体的病毒制品接触，其中所述病毒保留在所述凝胶渗透色谱柱上；以及

用包含至少一种赋形剂、二价阳离子和磷酸盐缓冲盐水的洗脱缓冲液从所述凝胶渗透色谱柱上回收所述病毒，

其中所述至少一种赋形剂包含组氨酸或蔗糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述液体载体为洗脱缓冲液。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述至少一种赋形剂包含甘露糖醇或山梨糖醇中的一者或多者。

4.根据权利要求1-3中任一项所述的方法，其中所述二价阳离子为Mg²⁺。

5.根据权利要求4所述的方法，其中Mg²⁺以氯化镁形式存在。

6.根据权利要求1-5中任一项所述的方法，其中所述磷酸盐缓冲盐水包含一种或多种磷酸盐与一种或多种氯盐的组合。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述一种或多种磷酸盐包含磷酸二钠。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述一种或多种磷酸盐包含磷酸二氢钾。

9.根据权利要求6所述的方法，其中所述一种或多种氯盐包含氯化钠。

10.根据权利要求6或9所述的方法，其中所述一种或多种氯盐包含氯化钾。

11.根据权利要求1-10中任一项所述的方法，其中所述洗脱缓冲液进一步包含非离子型洗涤剂。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述非离子型洗涤剂为聚山梨酯80。

13.根据权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含甘露糖醇、组氨酸、山梨糖醇、聚山梨酯80和MgCl₂，并且其中所述磷酸盐缓冲盐水包含磷酸二钠、磷酸二氢钾、氯化钠和氯化钾。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述洗脱缓冲液包含蔗糖、聚山梨酯80和MgCl₂，并且其中所述磷酸盐缓冲盐水包含磷酸二钠、磷酸二氢钾、氯化钠和氯化钾。

15.根据权利要求1-14中任一项所述的方法，其进一步包括将所述病毒储存在所述洗脱缓冲液中。

16.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述病毒为溶瘤病毒。

17.根据权利要求1-15中任一项所述的方法，其中所述病毒为非包膜病毒。

18.根据权利要求1-17中任一项所述的方法，其中所述病毒为呼肠孤病毒。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述呼肠孤病毒为哺乳动物呼肠孤病毒。

20.根据权利要求19所述的方法，其中所述哺乳动物呼肠孤病毒为人呼肠孤病毒。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述人呼肠孤病毒为血清3型病毒。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述血清3型病毒为Dearing株。

23.根据权利要求18所述的方法，其中所述呼肠孤病毒为重组或重排呼肠孤病毒。

24.根据权利要求18所述的方法，其中所述呼肠孤病毒为IDAC#190907-01。

25.一种装置，其包括：

凝胶渗透色谱柱；以及

洗脱缓冲液，

其中所述洗脱缓冲液包含至少一种赋形剂、二价阳离子和磷酸盐缓冲盐水，并且

其中所述至少一种赋形剂包含组氨酸或蔗糖。

26.根据权利要求25所述的装置，其中所述凝胶渗透色谱柱用所述缓冲液平衡。

27.根据权利要求25或26所述的装置，其进一步包括包含病毒和液体载体的病毒制品。

28.一种洗脱缓冲液，其包含：

至少一种赋形剂；

二价阳离子；

非离子型洗涤剂；以及

磷酸盐缓冲盐水，

其中所述至少一种赋形剂包含组氨酸或蔗糖，并且其中所述洗脱缓冲液为凝胶渗透色谱洗脱缓冲液。