[发明专利]一种分离磷脂的方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于从自海产品分离磷脂以及用于生产富含多不饱和的、长链的脂肪酸（PUFA）级分（fraction）的方法。海洋磷脂，尤其包括长链Ω-3脂肪酸（如二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA））的那些，作为用于功能性食品的添加剂，作为一种膳食补充剂以及用于药物应用是有用的。海洋磷脂可以为人类和动物两者的健康提供有益作用。

背景技术

近年来，已经发现包含多不饱和脂肪酸的磷脂在生理学上发挥了重要的作用。因此，磷脂作为用于功能性食品和药物应用中的候选材料已经引起了很多关注。

在许多的生物材料来源（如植物材料或衍生自动物的物质）中发现了磷脂。海洋动物包括一种特别有前景的磷脂源（由于这些磷脂的特殊组成），在海洋磷脂中尤其PUFA，如Ω-3脂肪酸，例如二十碳五烯酸（EPA）、二十二碳六烯酸（DHA）和二十二碳五烯酸（DPA）的量是非常大的。

磷脂典型地包括一个具有两个脂肪酸链的中心甘油部分以及一个可进一步被衍生的磷酸基团。磷脂由以下主要结构单元组成：脂肪酸、甘油、磷酸、氨基醇类、以及碳水化合物类。磷脂还可以被称为极性类脂，并且在本申请的背景下，术语“磷脂”和“极性类脂”可以可互换地进行使用。磷脂通常被认为是结构性类脂，在例如植物、微生物和动物的细胞膜结构中发挥重要的作用。磷脂的实例是磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、双磷脂酰甘油。因为它们的化学结构，磷脂具有一种双极性性质，展现了在极性和非极性溶剂两者中的溶解性或部分溶解性。

海洋磷脂的一个重要特征是它们通常含有具有两个或更多个不饱和键、尤其具有四个或更多个不饱和键的PUFA。磷脂的类脂部分通常是Ω-3类型的，当被结合到磷脂中时，该Ω-3类型常常展现出增强的稳定性，例如氧化稳定性。

在现有技术中存在从原料中提取并且分离磷脂的几种方法。此类方法典型地涉及与额外的单元操作相结合的溶剂提取。以下提供了现有技术方法的几个实例。

WO 2001/76385披露了一种用于从富含极性类脂（具有高度不饱和脂肪酸，即具有四个或更多个不饱和键的脂肪酸）的生物材料生产富含极性类脂材料（如磷脂）的方法。用于WO 2001/76385的方法的适当生物材料包括鱼、甲壳类动物、微生物、蛋、脑组织、奶、肉和植物材料（包括油籽）。蛋黄被认为是富含高度不饱和脂肪酸的极性类脂的主要商业来源。

WO 2001/76385的方法包括在水中至少68%的水溶性有机溶剂的浓度下使用一种水溶性有机溶剂（例如一种醇）从生物材料中提取极性类脂。然后通过密度分离，如使用重力或离心力将在高浓度的水溶性有机溶剂中不可溶的变性蛋白质作为一种沉淀物进行分离。然后可以将该富含极性类脂/油的液体级分与水进行混合至在水中从5%至35%的可溶性有机溶剂的最终浓度以便沉淀极性类脂，并且然后通过密度分离将极性类脂从该油中分离。在WO 2001/76385中用于密度分离的一个示例性单元操作是一个沉降式离心机。

US 6,372,460披露了一种尤其从藻类和含有显著量的DHA的其他单细胞有机体提供DHA磷脂材料的方法。在一个实例中，用己烷提取干燥的生物质（一种藻类）以提供一种富含DHA的己烷级分，将该级分经离心以去除细小颗粒。然后将DHA-磷脂进行化学沉淀并且随后通过离心作用收集该DHA-磷脂。

JP 2006-311853披露了一种用于从鱼和贝类生产磷脂组合物的方法。特别关注的是，JP 2006-311853提供一种不含重金属（如镉）的磷脂组合物。在JP 2006-311853的方法中，用水煮起始材料，如鱼废物。然后使用离心分离和/或过滤将该煮过的材料分离为一个固相和一个液相。然后使该固相经受一个有机溶剂提取过程。该有机溶剂可以是甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、丙酮、氯仿、二氯甲烷、己烷或水性丙酮。然后将该有机溶剂从现在不含重金属的提取物中去除，该提取物经受了色谱纯化。

JP 2008-255182描述了一种用于从可食用来源，如鱼的可食用部分和内脏器官以及贝类生产一种磷脂组合物的方法。在JP 2008-255182的方法中，首先用微波加热该起始材料以使酶灭活，否则的话该酶会将感兴趣的磷脂水解。然后用一种溶剂，如乙醇、己烷或丙酮（优选乙醇）提取该热处理过的材料。