[发明专利]用于激发T细胞的方法

说明书

技术领域

本发明涉及免疫学和传染病治疗领域，更具体地涉及一种活化抗原特异性T细胞的方法及通过所述方法制备的T细胞。

背景技术

对T细胞识别病毒和肿瘤特异性抗原的机制的增加的理解，使得对使用特异性T细胞作为用于传染病和恶性疾病的过继免疫治疗产生了很大的兴趣。可以将细胞免疫治疗广义地定义为施用免疫系统的效应细胞用于疾病的治疗。细胞免疫系统的主要功能是对病原体，包括急性和持续性感染提供保护。

T细胞识别感染的细胞并通过杀伤这些靶细胞防止疾病发作。然而，病原体与免疫系统的相互作用是复杂的，这通过在存在特异性T细胞时发生慢性感染，从而病原体明显地可以逃避T细胞监视得到证实。

事实上T细胞检测任何致病入侵者的能力是由其非常多样的受体库赋予的，受体库允许T细胞池识别由主要组织相容性复合体（MHC）分子递呈的大量的肽。而且，通过T细胞受体（TCR）(信号1)的信号转导不足以产生充分的T细胞活化，因为共刺激分子提供了用于增殖、存活和分化所不可缺少的信号（信号2）。实际上，仅接受信号1而没有信号2的原初T细胞被认为是无活动力（非反应）的或通过细胞凋亡而死亡。完全的T细胞活化需要信号1和2共同起作用，并且这些信号的强度决定了接着产生的T细胞池的大小。而且，完全分化为效应T细胞通常依赖于第三信号，其由抗原呈递细胞（APC）以可溶性形式提供，并提供用于需要的效应T细胞类型的指导性信号。这个“三个信号”的概念描述了用于活化原初T细胞以及随后形成效应T细胞的模型。然而，免疫系统提供了大量多种共刺激分子并且这些多种类型的信号2和3均以其独特的方式有助于T细胞应答的质量。共刺激信号和可溶性形式的信号3可作用于T细胞活化的特定方面，如存活、细胞周期进程、待发展的效应细胞的类型和分化成效应细胞或记忆细胞。

现在普遍接受了成熟的抗原呈递树突细胞（DC）需要由其它淋巴细胞，包括CD4⁺T细胞、NK细胞和NKT细胞“辅助”，以诱导长期生存的记忆CD8⁺T细胞。这种“辅助”诱导所述成熟DC进一步分化，这个过程称为激活（licensing）。“辅助”信号对DC有多种作用，包括上调共刺激分子、分泌细胞因子和上调多种抗细胞凋亡分子，这些都累积性地增强DC最佳活化同源T细胞，特别是CD8⁺T细胞的能力。而且，“辅助”淋巴细胞也可表达或分泌直接影响T细胞存活、细胞周期进程、待发展的效应细胞类型和分化成效应细胞或记忆细胞的因子。

持续性或慢性病毒感染，如HIV、HBV或HCV或疱疹病毒CMV和EBV，对社会造成重大威胁，并且对感染个体的治疗方案也是迫切需要的。在病毒持续感染期间，病毒与宿主的免疫反应之间的平衡是至关重要的。免疫系统使病毒受到控制，而病毒通过逃避免疫反应以避免被清除进行对抗，最终在许多情况下，平衡倾向于有利于病毒并引起疾病。在最持久的病毒感染中，病毒抗原持续存在，使病毒特异性T细胞功能失调。

在过去的20年中，人类免疫缺陷病毒（HIV）感染已成为流行病，超过4千万人感染获得性免疫缺陷综合征（艾滋病），并已经有超过2千万人死亡。来自暴露的未感染的数据以及来自长期非进展者的数据强烈地表明HIV特异性CD8⁺和CD4⁺T的细胞功能对于保护性免疫力是必不可少的。

虽然CD4(+)T辅助细胞对病毒的反应受损，HIV特异性CD8(+)T细胞以高频度持续存在于HIV感染患者中，但是，与其它分化的效应细胞毒性T淋巴细胞不同，大部分CD8(+)T细胞持续表达肿瘤坏死因子受体家族成员CD27。CD27的配体（CD70）在HIV感染宿主中也是过表达的，因此HIV特异性CD8(+)T细胞上CD27表达的表达性质和潜在功能结果是令人感兴趣的。源自相同HIV特异性克隆的CD27(+)和CD27(-)T细胞的分析显示CD27的保留不干扰效应器功能的获得，并且在T细胞受体刺激后，同时通过CD27刺激的CD27(+)细胞比CD27(-)T细胞对细胞凋亡、白细胞介素2的产生和增殖表现更强的抗性。在转移回HIV感染的患者后，自体HIV特异性CD27(-)T细胞快速消失，但是源自相同克隆的CD27(+)T细胞以高频度持续存在。因此表明在HIV感染中CD27-CD70相互作用可提供具有存活优势的CD27(+)CD8(+)T细胞，并且可补偿限制或缺乏CD4(+)T辅助以保持CD8应答（Ochsenbein等，Exp Med.2004Dec6;200(11):1407-17）。