[发明专利]多能干细胞和刺激并从哺乳动物血液提取非胚胎多能干细胞和使用复原多能干细胞治疗包括慢性阻塞性肺病的疾病的方法

说明书

交叉引用

本申请案主张2011年1月31日申请的美国临时专利申请案第61／437,705号的权益，所述申请案出于所有目的以全文引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明的实施例涉及扩大非胚胎多能干细胞数目的方法和其用于治疗疾病的用途，所述疾病如慢性阻塞性肺病(COPD)、肌肉萎缩症、普通神经病、糖尿病性神经病、张力减退、ALS和自体免疫性疾病。

背景技术

胚胎干细胞的使用一直面对着并且继续面对着来自许多政府、医生和其它有关各方的道德挑战。因此，使用非胚胎干细胞已经变成干细胞领域的研究人员的主要焦点。非胚胎干细胞的一个问题一直是在人类(或动物)组织中分离并扩大其数目。

因此，需要扩大在人类组织中可获得的非胚胎干细胞的数目并且开发收集、复原和再引入非胚胎干细胞到个体中以用于治疗COPD和其它疾病的方法。

发明内容

本发明的实施例涉及扩大非胚胎多能干细胞数目的方法和其用于治疗不治之症的用途。在一个实施例中，一种方法大致包含：(i)使用干细胞刺激剂以增加个体的组织和／或血流中的非胚胎多能干细胞的数目；(ii)从所述个体抽取血液；(iii)从其它血液成分分离非胚胎多能干细胞；(iv)复原非胚胎多能干细胞；和(v)将复原的非胚胎多能干细胞输注或返还到所述个体中以治疗所鉴别的疾病。

本发明的实施例涉及活体内倍增位于哺乳动物(包括人类)整个体内的结缔组织生态席位中的多能干细胞。在一个实施例中，使活体内倍增的多能干细胞移动到身体的外周血管结构中。在一个实施例中，通过静脉穿刺从外周血液循环收集活体内多能干细胞。在一个实施例中，通过在0到10摄氏度下重力沉降24到72小时，从多能干细胞释放造血要素。在一个实施例中，通过静脉内(IV)输注将多能干细胞以快速注射多能干细胞形式输注回血管结构中。在一个实施例中，将多能干细胞喷雾到肺气管到肺泡囊中以愈合从支气管到肺泡囊的肺内衬细胞。其它输注方法同样适用。

干细胞离体繁殖涉及干细胞在培养物中生长，所述培养物常规地补充有动物和／或人类血清以优化并增强细胞活力。血清的成分包括水、氨基酸、葡萄糖、白蛋白、免疫球蛋白和一种或一种以上生物活性剂。存在于血清中的潜在生物活性剂包括诱导增殖的试剂、加速表型表达的试剂、诱导分化的试剂、抑制增殖的试剂、抑制表型表达的试剂和抑制分化的试剂。令人遗憾的是，不同的血清批次中所含的特定生物活性剂的一致性、浓度和潜在组合是未知的。血清中这些未知试剂中的一种或一种以上已经显示出对谱系未定分裂球样干细胞的分离、培养、低温贮藏和纯化的负面影响。类似地，当为干细胞采用饲养层时，频繁发生干细胞培养物被饲养层特定组分和尤其是病毒污染。

或者，已知不含血清的培养基用于普通细胞培养物，并且所选多能干细胞已经在含有多种生长因子的这种培养基中繁殖，如美国公开申请案第2005／0164380号和第2003／0073234号；美国专利第6,617,159号和第6,117,675号；和欧洲专利第1,298,202号中所述。

以前，通常从骨髓抽出物、脂肪组织和结缔组织中分离人类和哺乳动物来源的多能干细胞。从这些组织中提取多能干细胞所需的步骤是困难和耗时的，培养物污染的可能性成倍增加。

本发明的其它变体、实施例和特征将由以下详细描述、图式和权利要求书而变得显而易见。

附图说明

图1展示了详述根据本发明实施例的第一程序的流程图；

图2展示了详述根据本发明实施例的第二程序的流程图；

图3a-31展示了治疗前患者的问卷和根据本发明实施例治疗的帕金森氏病(Parkinson′s)患者的相应治疗后问卷；

图4a-4d展示了治疗前患者的问卷和COPD患者根据本发明实施例治疗后的问卷；并且

图5a-5b展示了治疗前患者的问卷和MS患者根据本发明实施例治疗后的问卷。

具体实施方式

为了促进理解根据本发明实施例的原理，现将参考图式中所示的实施例和用于描述其的特定语言。然而，应理解并不打算因此限制本发明的范围。相关领域和持有本发明的技术人员通常会想到的本文中所示本发明特征的任何变化和进一步修改，和如本文中所示本发明原理的任何其它应用都被视为在本发明所主张的范围内。