[发明专利]能将不含试样的样品确定为不当操作样品的免疫层析检测方法及其使用的测试条

说明书

技术领域

本发明涉及检测通过稀释试样获得的样品中的分析物的免疫层析方法。特别地，本发明涉及能通过检测试样中所包含的且不同于分析物的组分是否存在来识别未加入试样的情形的免疫层析检测方法，以及所使用的测试条和检测试剂盒。

背景技术

近来诊所和小医院对于“在患者检查中进行多种检测”的需求日趋增加，而且检测越来越多地以床边检测(point-of-care testing,POCT)代替传统的外包检查进行。POCT试剂的代表性实例包括侧流免疫层析测试条(专利文献1)。典型的免疫层析测试条具有用于检测分析物的检测线和表明反应完成的对照线(相当于本发明下文所述的第二对照线；“背景技术”的以下描述中与此相同)。分析物与固定有分析物的抗体的标记物的复合物被固定在不溶膜上的抗体捕获，形成检测线，同时检测线上未被捕获的剩余标记物被对照线上的抗免疫球蛋白抗体捕获，形成对照线。

使用免疫层析检测方法的测定方法包括在视觉上确定检测线颜色的定性方法和通过专用设备测定检测线颜色强度的定量方法，在诊所和小医院的检查中使用相应于各自方法的免疫层析测试条和装置。

对于通过专用设备测定免疫层析测试条上检测线颜色强度的定量方法，可以进行不同的预处理，这取决于试样的类型、所使用试样的数量和试剂的测定原理。因此，例如可以通过直接滴加试样、滴加用专用稀释液稀释的试样、或在滴加专用稀释液之前滴加少量试样的方法，将样品施加到测试条或装置上。在这些情况下，例如，在试样来自婴儿或儿童因此难以获得大量试样时，或者当试样中分析物为高浓度且要将分析物浓度调整至适合于检测的浓度时，用专用稀释液对试样进行稀释。

如果稀释的是包括红细胞的血液试样，则稀释试样获得的样品中显现血红蛋白的颜色，因此，可以在视觉上确定样品是否包含试样。然而，如果以高稀释倍数稀释颜色相对浅的试样例如血浆、血清和尿，则难以用裸眼区分稀释的样品溶液和试样稀释液本身。因此，可能忘记加入试样而仅将试样稀释液作为样品滴加在测试条上。

然而，由于典型的免疫层析测试条的对照线是通过捕获在与检测线的反应中没有使用的标记物所形成的，因此即使在测试条上仅滴加专用稀释液，也会出现对照线。因此，在由于未加入试样而导致样品仅由稀释液组成的情况下，检测视为完成，得到阴性结果或者浓度确定为“零”。因此，这导致不正确的诊断。

如上所述，从未报道过包含检测未加入试样情形的步骤的免疫层析检测方法以及包含检测未加入试样情形的工具的免疫层析测试条。

引用文件列表

专利文献

专利文献1：日本未审专利申请公开号(PCT申请的翻译)No.2007-524813

发明概述

技术问题

本发明的一个目的是提供包含检测未加入试样情形的步骤的免疫层析检测方法以及包含检测未加入试样情形的工具的免疫层析测试条。因此本发明的一个目的是提供：检测通过稀释浅色试样例如血浆、血清和尿获得的样品中的分析物的免疫层析检测方法，其中如果测定的是未加入试样的样品，则样品被确定为不当操作样品以使得能够检测到未向稀释液加入试样的情形；以及使用的免疫层析测试条。

解决问题的技术方案

本发明人发现，在检测通过稀释试样获得的样品中的分析物的免疫层析检测方法中，可以通过用固相化在不溶膜上的抗体捕获试样所包含的不同于分析物的组分(对照组分)与标记物（所述标记物固定有该组分的抗体）的复合物，检测对照组分是否存在来检测未加入试样的情形，从而完成本发明。

因此，本发明如下所述。

[1]一种检测通过稀释试样获得的样品中的分析物的免疫层析检测方法，包含以下步骤：

1)向免疫层析测试条的样品垫提供样品，其中免疫层析测试条包含：

a)样品垫，

b)设置在相对于所述样品垫的下游的偶联物垫，所述偶联物垫包括：

固定有分析物的第一抗体的标记物，和

固定有对照组分的第一抗体的标记物，所述对照组分包含于试样中且不同于所述分析物，以及

c)设置在相对于所述偶联物垫的下游的不溶膜，其上固定有分析物的第二抗体和对照组分的第二抗体；

2)在不溶膜上检测分析物与分析物的第一和第二抗体的复合物是否存在；

3)在不溶膜上检测对照组分与对照组分的第一和第二抗体的复合物是否存在；以及

4)如果在3)的检测步骤中未能检测到复合物，则确定所述样品中不包含试样。

[2]上述[1]的检测方法，其中试样是血浆或血清。