[发明专利]鉴别含有核酸的对象物的方法

权利要求书

1.一种鉴别含有核酸的对象物的方法，所述方法包括如下步骤：

（1）制备含有核酸的对象物，所述核酸具有与RNA-双探针的核苷酸序列互补的核苷酸序列；

（2）使所述对象物中含有的核酸与含有所述RNA-双探针和RNase的缓冲液进行反应，所述RNA-双探针分别缀合有报告子和淬灭子；以及

（3）对由所述报告子产生的荧光进行检测。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述核酸选自于由DNA、RNA和DNA-RNA杂合体所组成的组。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述核酸是单链DNA。

4.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述核酸在3′端和/或5′端添加有脂质。

5.如权利要求4所述的方法，其中，所述脂质是C₇-C₂₄脂质。

6.如权利要求1所述的方法，其中，所述含有核酸的对象物是液态对象物。

7.如权利要求1所述的方法，其中，所述含有核酸的对象物选自于由如下对象物所组成的组：汽油、煤油、柴油、用于机动车涂层的涂料、漆、用于交通道指示的涂料、涂料稀释剂、稀料、火药、天然油、建筑涂料、有机溶剂、胶、染料、肉类以及海产食品。

8.如权利要求1所述的方法，其中，所述核酸具有包含5-1,000个核苷酸的核苷酸序列。

9.如权利要求1所述的方法，其中，所述RNase是RNase H。

10.如权利要求1或9所述的方法，其中，所述RNase H在20℃-90℃的温度范围中具有活性。

11.如权利要求1所述的方法，其中，所述报告子和所述淬灭子与所述RNA-双探针的5′端或3′端缀合。

12.如权利要求11所述的方法，其中，所述报告子选自于由TAMRA（羧基四甲基罗丹明）、FAM（6-羧基荧光素）、Cy3、Cy5和Cy5.5所组成的组。

13.如权利要求11所述的方法，其中，所述淬灭子选自于由BHQ1（2,5-二叔丁基氢醌-1）、BHQ2、TAMRA和DABCYL所组成的组。

14.如权利要求1所述的方法，其中，所述缓冲液包含选自于由Tris、KCl、MgCl₂、MnCl₂和二硫苏糖醇所组成的组中的一种或多种组分。

15.如权利要求1或14所述的方法，其中，所述缓冲液还含有RNase抑制剂。

16.一种鉴别含有核酸的对象物的方法，所述方法包括如下步骤：

（1）制备含有核酸的对象物，所述核酸具有与RNA-双探针的核苷酸序列互补的核苷酸序列；

（2）从所述对象物中回收所述核酸；

（3）使所述对象物中含有的核酸与含有所述RNA-双探针和RNase的缓冲液进行反应，所述RNA-双探针分别缀合有报告子和淬灭子；以及

（4）对由所述报告子产生的荧光进行检测。

17.一种确认含有核酸的对象物是否为真的方法，所述方法包括如下步骤：

（1）制备含有核酸的对象物，所述核酸具有与RNA-双探针的核苷酸序列互补的核苷酸序列；

（2）使所述对象物中含有的核酸与含有所述RNA-双探针和RNase的缓冲液进行反应，所述RNA-双探针分别缀合有报告子和淬灭子；以及

（3）对由所述报告子产生的荧光进行检测。

18.如权利要求17所述的方法，其中，所述含有核酸的对象物选自于由如下对象物所组成的组：汽油、煤油、柴油、用于机动车涂层的涂料、漆、用于交通道指示的涂料、涂料稀释剂、稀料、火药、天然油、建筑涂料、有机溶剂、胶、染料、肉类以及海产食品。