[发明专利]诊断方法

说明书

技术领域

本发明涉及用于鉴定个体患有肝癌的的诊断方法。

发明背景

肝癌可以表现为原发性肝癌或继发性肝癌的形式，所述原发性肝癌被认为是起源于肝部的癌症，在所述继发性肝癌中，癌症起源于肝部并转移至其它器官。肝细胞癌(HCC)是原发性肝癌的最常见形式，并且是世界范围内癌症死亡的第三种最常见诱因^1,2,3。该疾病在发展中国家、并且特别在撒哈拉以南的非洲地区和亚洲地区是尤其普遍的⁴，其中许多国家表现出每100,000人中超过20例的高发病率。如果癌症不能被完全去除，则该疾病通常在3至6个月内变成致命的⁵。HCC的症状能变得非常严重并且包括黄疸、源自腹水的腹胀、源自凝血异常的易发瘀斑、食欲不振、无故消瘦、腹痛(特别是在右上部)、恶心、呕吐和疲劳⁶。

目前的诊断方法包括使用血清α-胎蛋白(AFP)对HCC进行筛查，血清α-胎蛋白是通常在出生之后不久便为不可检测的胎糖蛋白。大部分的HCC分泌AFP，但AFP具有不良灵敏度以及小于70%的特异性^7,8,9,10。此外，血清的AFP测试过于昂贵，并因此在非洲和亚洲的部分国家是不可行的。包括脱-γ-羧基凝血酶原、抗-p53、γ-谷氨酰基-转肽酶和异铁蛋白在内的许多其它血清标记物也用于筛查HCC，但和AFP一样，表现出低程度的灵敏度和特异性^11,12。

下列事实进一步加深了用于HCC的血清标记物的灵敏度和特异性的问题，所述事实为使用目前的方法难以将患有肝硬化的患者与患有HCC的患者相区分。HCC的早期诊断非常重要，因为小于2cm的病灶损害能通过切除术或移植来治愈。因此，在本领域中亟需开发具有足够高水平的灵敏度和特异性、能将患有HCC的患者、肝硬化的患者与健康对照相区分、甚至在疾病早期时就能区分的测试。

除了与血清标记物的低灵敏度和特异性相关的问题之外，在该疾病最普遍的区域出现了伦理注意事项。在许多非洲和亚洲国家中，宗教信仰禁止在疾病的筛查过程中使用侵入技术。还重要的是，来自测试的信息在实施测试之后可迅速获得，因为发展中国家的患者可能需要花费许多天的行程来往返于保健诊所。

使用CT扫描、MRI扫描和活组织检查能更精确地诊断HCC¹³。然而，与这些技术相关的成本和时间以及活组织检查的侵入性质意味着这些测试不适用于疾病最高度普遍的发展中地区。

因此，存在对开发用于诊断HCC的方法的需求，所述方法是特异性的和灵敏的，以及对于在发达国家和发展中国家的应用是实用且可行的。灵敏且特异性的测试将允许在早期检测疾病，显著改善了HCC患者的预后。

发明内容

因此，本发明提供了用于分析来自受试个体的样品的方法，其包括：

i)在来自所述受体个体的样品中测定选自甘氨酸、三甲胺-N-氧化物、马尿酸盐和柠檬酸盐的至少一种化合物的水平；以及

ii)将步骤i)中测定的所述至少一种化合物的水平与至少一种对照水平进行比较，其中所述至少一种化合物的水平表示个体是否患有肝癌。

令人惊讶地，发明人已发现与采集自健康个体的样品相比，在采集自患有肝癌的个体的样品中甘氨酸、三甲胺-N-氧化物、马尿酸盐和柠檬酸盐的水平显著更低。这类化合物的水平在以前从未作为用于诊断肝癌的方法的一部分而被测量。这些特定化合物的水平的测量允许用于肝癌的灵敏且特异性的筛查，并且可以使用广泛的简单分析来测量该化合物的事实将有助于在该疾病最普遍的发展中国家诊断肝癌。

本发明的方法可以包括i)测定来自受试个体的样品中的甘氨酸水平，以及将步骤i)中测定的甘氨酸水平与对照水平进行比较。

本发明的方法可以包括i)测定来自受试个体的样品中的三甲胺-N-氧化物水平，以及将步骤i)中测定的三甲胺-N-氧化物水平与对照水平进行比较。

本发明的方法可以包括i)测定来自受试个体的样品中的马尿酸盐水平，以及将步骤i)中测定的马尿酸盐水平与对照水平进行比较。

本发明的方法可以包括i)测定来自受试个体的样品中的柠檬酸盐水平，以及将步骤i)中测定的柠檬酸盐水平与对照水平进行比较。