[发明专利]固体支持物和提高生物材料从其中的回收率的方法

说明书

发明领域

本发明涉及固体支持物，特别地涉及可用于生物材料例如生物制药药物的储存、回收和进一步处理的固体支持物。

发明背景

使用固体支持物例如滤纸来收集和分析人血液可回溯至1960年代早期，当时Robert Guthrie博士为检测苯丙酮尿症而使用干血斑(DBS)样本测定新生儿中的苯丙氨酸(Mei， J.等，2001；Joumal ofNutrition，131：1631S-1636S)。这一收集血液的新应用引发了新生儿的群体筛查以检测可治疗的遗传代谢疾病。现在DBS用于筛查大量的新生儿代谢疾病已经40多年了。

DBS样本通过将来自静脉血或直接来自指尖或足跟针刺的全血点在固体支持物例如膜、玻璃纤维或纸上进行收集，使得这种方法特别适合样本从周边诊所运输到中心实验室。此外，包装在带有干燥剂的拉锁(zip-lock)塑料袋中的DBS能够在室温下储存和运输，因此避免需要i)冷链储存和ii)快速专用运输。通过将血滴涂到吸收材料例如Whatman903新生儿STD纸上收集的DBS不受IATA危险物品规定(IATA Dangerous Goods Regulations)(附录II，2005年3月)的管制。

其他用于收集、运输和储存用于婴儿和新生儿筛查目的的DBS和其他体液的固体纸质支持物包括：

1.Ahlstrom226

2.Munktell TFN(CE标记)

3.Toyo Roshigrade545Advantec Toyo，Tokyo(参见Elvers L等2007；J.Inherit Medtab Dis30，4，609)。

所有这些纸，例如Whatman903新生儿STD纸，由棉毛纤维构成。Whatman903新生儿STD纸和Ahlstrom226纸被划分为II类医疗卫生器材。有潜力发展为用于婴儿和新生儿筛查目的的器材的固体纸质支持物包括由Macherey Nagel(例如MN818)、Reeve Angel(例如Double ring)和Hahnemuhle Grade2292生产的那些固体纸质支持物。

DBS的消耗费用小于1美元/测试，而且与需要液体形态和专用运输条件的血浆相比，运输费用显著下降(Johannessen，A.等，2009；J Antimicrobial Chemotherapy，64，1126-1129)。尽管实际测试费用保持未变，并且在中心实验室从DBS提取分析物包含一些额外的操作时间，但DBS和特别的固体纸质支持物的使用正越来越多地用于储存和/或分析生物材料例如核酸、蛋白质等。此外，DBS还被用于药物发现过程中，其中将候选的低分子量药物化合物注入测试动物，并监测血液中的浓度水平。

近年来，生物技术来源的重组蛋白、肽和基于抗体的药物以及用于基因治疗的反义寡核苷酸和DNA已发展成为主流的治疗药剂，并且现在构成临床开发下的化合物的主要部分。这些药剂通常被称为“生物技术药物”或“生物制药药物”，以将其与低分子量药物化合物区分。

生物技术药物和低分子量药物化合物的药物代谢和药代动力学(DMPK)分析很重要，因为DMPK分析对药物发现至关重要，其对候选药物可能如何被机体吸收、代谢和排出提供深入的了解。分析通常在药物发现阶段进行，并包括将目的化合物给予动物和测定生物液体中药物(或代谢物)浓度作为时间函数。这产生了有价值的信息，例如药物清除、生物利用度等，但是需要大量时间和资源(Beaudette，P.等，2004；J.ofChromatography B809，153-158)。

与通常在药物筛选程序中进行的DMPK分析有关的主要问题是明显缺乏合适的用于在分析前保持血液样本稳定性和完整性的储存介质。目前的方法使用在指定时间从给药的动物收集的血浆或全血。然而，这种方法有许多缺陷，包括涉及耗时步骤，其造成分析过程中的瓶颈。此外，对于时程实验，单只动物多次抽血是有限制的。这给高通量带来了限制并增加了动物的使用，其结果是较少的先导化合物能够得以开发。

DBS需要少的血液体积，使得能够从一只动物连续取血，而不是从数只动物混合取血，这显著改善了DMPK和毒理动力学数据和评估的质量。对于“3R”(减少、优化和代替)，DBS所需要的减少的血液体积(通常15-20μl/斑点)的伦理学益处在临床前药物研发中是显而易见的。测试动物的数量能够显著降低。此外，在幼年毒理学研究中非末端取血是可能的，当局正逐渐要求幼年毒理学研究作为儿科用药的安全性评估的一部分。调整的动物毒理学研究的另一优点是数据质量的提高。