[发明专利]一种具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法

权利要求书

1.一种具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于所述方法按如下步骤进行：

（1）将新鲜竹叶清洗、烘干后粉碎并过20目筛，获得竹叶粉末，将竹叶粉末与水以质量比1:7~10混合后，在室温下搅拌浸泡1~3小时，然后升温至80~100℃下加热回流浸提0.5~3h，冷却至30~50℃后过滤，获得滤液，即竹叶水提物；

（2）在步骤（1）获得的竹叶水提物中搅拌加入絮凝剂，在室温下静置2~ 6小时，然后离心，弃去沉淀，获得上清液a；所述絮凝剂为海藻酸钠、壳聚糖或羧甲基纤维素；

（3）将步骤（2）获得的上清液a减压浓缩后加入乙醇水溶液使乙醇体积终浓度为70~90%，静置4~12小时后，取上清液b减压浓缩至浓缩物无乙醇味，获得浸膏；

（4）将步骤（3）获得的浸膏加水配成混合液，再将混合液用萃取剂在50~80℃条件下搅拌30~ 90分钟进行萃取，萃取完全后冷却至30~ 40℃，静置分层，获得上层萃取液和下层萃余液，将上层萃取液减压浓缩至混合液体积的0.3~0.5倍，即得竹叶黄酮粗提液；所述萃取剂由有机溶剂A和有机溶剂B以体积比为1000:1~5混合组成，有机溶剂A为乙酸乙酯或乙酸乙酯与异丙醇以体积比5~9:1的混合溶液；有机溶剂B为乙酸；

（5）将步骤（4）获得竹叶黄酮粗提液进行柱层析，以体积浓度70%~80%的乙醇水溶液为洗脱剂，收集含目标组分的洗脱液，将洗脱液减压浓缩除去水，获得竹叶黄酮提取物。

2.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（2）所述絮凝剂以质量浓度0.1~5%絮凝剂水溶液的形式加入。

3.如权利要求2所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（2）所述絮凝剂水溶液与竹叶水提物体积比为1~5:1000。

4.如权利要求2所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（2）所述絮凝剂以质量浓度1%絮凝剂水溶液的形式加入，絮凝剂水溶液与竹叶水提物体积比为2:1000。

5.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于将步骤（2）获得的上清液a体积减压浓缩至步骤（1）获得的竹叶水提物体积的1/20~1/30倍，加入体积浓度95%乙醇水溶液使乙醇体积终浓度为70~90%。

6.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（4）中所述混合液是将步骤（3）获得的浸膏加水配成步骤（1）获得的竹叶水提物体积的1/10~1/8倍。

7.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（4）中所述萃取剂由有机溶剂A和有机溶剂B以体积比为1000:2混合组成，有机溶剂A为乙酸乙酯或乙酸乙酯与异丙醇以体积比8:1的混合液；有机溶剂B为乙酸。

8.如权利要求7所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（4）中所述萃取剂的体积用量与混合液的体积比为2~5:1。

9.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于步骤（5）中所述柱层析按如下步骤进行：将步骤（4）获得竹叶黄酮粗提液以0.01~ 0.05BV/min速度加入装有聚乙烯聚吡咯烷酮的层析柱，先用2~5BV的蒸馏水洗脱至流出液无色，再以3~5 BV 体积浓度70%~80%的乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液减压浓缩除去水，获得竹叶黄酮提取物。

10.如权利要求1所述的具有降血糖活性竹叶黄酮提取物的制备方法，其特征在于所述步骤（5）中聚乙烯聚吡咯烷酮用量为竹叶粉末质量的1/2。