[发明专利]一种能同时测定替米考星与磺胺含量的HPLC方法

权利要求书

1.一种能同时测定替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其特征在于通过改变梯度洗脱的流动相比例和提取液的配比，达到将制剂中的主要成分逐一分离并进行外标法含量测定。

2.根据权利要求1 所述的一种能同时测定替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其特征在于流动相的梯度洗脱程序。

3.根据权利要求2所述的一种能同时测定替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其特征在于其特征的流动相梯度洗脱程序为：

4.根据权利要求3所述的一种能同时测定含替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其特征在于所述流动相为：乙腈为流动相A；水-磷酸二丁胺溶液〔取二丁胺16.8mL，加磷酸溶液（1→10）70mL，边加边搅拌，放冷后，加水至100mL〕（975：25）用磷酸调节pH值至2.5±0.1为流动相B； 10%甲醇溶液为流动相C。

5.根据权利要求1所述的一种能同时测定替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其使用的提取液的配制方法为：取乙腈400-600ml和pH5.0-8.0的磷酸盐缓冲液25mL加入适量水中，用水稀释至1000 mL。

6.根据权利要求1所述的一种能同时测定含替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其所述的磺胺主要为磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲嘧啶钠、磺胺氯吡嗪钠、磺胺氯哒嗪钠中的一种或多种。

7.根据权利要求1至6任一所述的一种能同时测定含替米考星与磺胺含量的HPLC方法，其特征在于具体实施步骤如下：

色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂（Diamonsil   C18，4.6mm×  250mm，5μm, 10 nm），柱温30±5℃；流速为1.1mL/min；检测波长为280nm；

取含替米考星、磺胺的组合物适量，精密称定，置棕色量瓶中，加提取液稀释至每1ml含替米考星0.5 mg的溶液，摇匀，滤过，作为供试品溶液；

替米考星对照品溶液的制备  精密称取替米考星对照品约25mg，置50mL棕色量瓶中，用提取液稀释至刻度，摇匀，得每1mL中含0.5mg的溶液，作为替米考星对照品溶液；

磺胺对照品溶液的制备  精密称取磺胺对照品约25mg，置50mL棕色量瓶中，用提取液稀释至刻度，摇匀，得每1mL中含0.5mg的溶液，作为磺胺对照品溶液；

精密量取对照品溶液和供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算替米考星（C₄₆H₈₀N₂O₁₃）（以顺式和反式异构体峰面积之和）和磺胺的含量。