[发明专利]荧光假单胞菌及其在制备反式-4-氨甲基-环己烷甲酸中的应用

权利要求书

1.荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）ZJB09-108，保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国，武汉，武汉大学，邮编430072，保藏编号CCTCC No：M2012539，保藏日期2012年12月20日。 

2.一种权利要求1所述荧光假单胞菌ZJB09-108在微生物转化制备反式-4-氨甲基-环己烷甲酸中的应用，其特征在于所述的应用以荧光假单胞菌ZJB09-108经发酵培养后获得的湿菌体为催化剂，以顺反式-4-氨甲基-环己烷甲酸为底物，在pH 5.0~9.0的水或缓冲液构成的转化体系中进行转化反应，反应完全后，将转化反应液离心，取上清液即获得含反式-4-氨甲基-环己烷甲酸的反应液，将反应液分离纯化，获得反式-4-氨甲基-环己烷甲酸。

3.如权利要求2所述荧光假单胞菌ZJB09-108在微生物转化制备反式-4-氨甲基-环己烷甲酸中的应用，其特征在于所述转化体系中催化剂的用量以湿菌体质量计为0.5~50 g/L，所述湿菌体的含水量为80~90%，所述转化体系中底物的初始浓度为0.5~50 g/L。

4.如权利要求2所述荧光假单胞菌ZJB09-108在微生物转化制备反式-4-氨甲基-环己烷甲酸中的应用，其特征在于所述转化反应是在20~ 45℃反应0.5~24h，获得含反式-4-氨甲基-环己烷甲酸的反应液。

5.如权利要求2所述荧光假单胞菌ZJB09-108在微生物转化制备反式-4-氨甲基-环己烷甲酸中的应用，其特征在于所述催化剂按如下方法制备：

（1）斜面培养：将荧光假单胞菌ZJB09-108接种于斜面培养基，于20~37℃下培养20~48小时，获得斜面活化菌种；所述斜面培养基终浓度组成为：牛肉膏1~5 g/L，蛋白胨1~15 g/L，NaCl 3~10g/L，琼脂15~20g/L，溶剂为水，初始pH为6.5~8.0；

（2）种子培养：挑取一接种环斜面活化菌种接种于种子培养基，在25~37℃、摇床转数100~200r/min条件下培养18~20小时得到种子液；所述种子培养基终浓度组成为：牛肉膏1~5 g/L，淀粉1~20 g/L，葡萄糖1~20 g/L， 甘油1~20 g/L，蛋白胨1~15 g/L，NaCl 3~10g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5~2 g/L，溶剂为水，初始pH为6.5~8.0；

（3）发酵培养：将种子液以体积比1~10%接入发酵培养基，在25~37 ℃、摇床转数100~200r/min条件下培养18~ 48小时，将培养液离心、洗涤，收集湿菌体，冷藏备用；所述的发酵培养基终浓度组成为：牛肉膏1~5 g/L，淀粉1~20 g/L，葡萄糖1~20 g/L，甘油1~20 g/L，蛋白胨1~15 g/L，NaCl 3~10g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5~2 g/L，溶剂为水，初始pH为6.5~8.0。