[发明专利]一种利用超高效液相/三重四极杆串联质谱固相萃取水中苯并（a）芘的方法

说明书

技术领域

本发明属于水质检测领域，更具体地说，涉及一种利用超高效液相/三重四极杆串联质谱固相萃取水中苯并（a）芘的方法。

背景技术

苯并[α]芘（Benzo（a）pyrene），是熏制食品、烘烤食品、煎炸食品中或煤焦油、各类碳黑和煤、石油等燃烧时产生的烟气、香烟烟雾、汽车尾气中，以及焦化、炼油、沥青、塑料等工业污水中主要的毒素和致癌物。地面水中的苯并[α]芘除了工业排污外，主要来自洗刷大气的雨水，属于多环芳烃(PAHs)。苯并[α]芘是已发现的200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物，而且污染广泛，污染量大，致癌性强。 在水体、土壤和作物中苯并[α]芘都容易残留。许多国家都进行过土壤中苯并[α]芘含量调查，残留浓度取决于污染原的性质与距离，在繁忙的公路两旁的土壤中苯并[α]芘含量为2.0mg/kg，在炼油厂附近土壤中是200mg/kg；被煤焦油，沥青污染的土壤中，可以高达650mg/kg，食物中的苯并[α]芘残留浓度取决于附近是否有工业区或交通要道。进入食物链的量决定于烹调方法，不适当的油炸可能使苯并[α]芘含量升高，但进入人体组织后，分解速度比较快。水中的苯并[α]芘主要是由于工业“三废”排放。残留时间一般不太长，特别在阳光和微生物影响下，数小时内就被代谢和降解。

我国的《生活饮用水卫生标准》中对苯并[α]芘的监测指标有很高的要求。因此对于苯并[α]芘分析技术灵敏度、定性、定量上必须有更高的要求。我国标准方法是高效液相色谱法（HPLC），国际上通常采用气质（GC/MS）、液相（HPLC）-荧光分析技术，GC/MS定性准确但灵敏度不强，HPLC-荧光技术灵敏度很强但定性效果差，目前采用液质（LC/MS/MS）的分析技术国内外还没有，这种技术一方面弥补了以上方法的不足，另一方面集中了两种方法的优点。

发明内容

要解决的技术问题

针对现有技术中水中苯并（a）芘检测方法存在的难以同时满足灵敏度、定性、定量的检测要求的问题，本发明提供了一种利用超高效液相/三重四极杆串联质谱固相萃取水中苯并（a）芘的方法，该方法操作简便，且检测快速，结果灵敏度高、准确、重现性好。

技术方案

本发明的目的通过以下技术方案实现。

本发明的一种利用超高效液相/三重四极杆串联质谱固相萃取水中苯并（a）芘的方法，其步骤为：

（1）标准曲线绘制

将甲醇：二氯甲烷按照1：1的体积比混合制得苯并[α]芘的标准储备液，苯并[α]芘储备液用流动相稀释成1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L、50.0μg/L、100.0μg/L的系列标准溶液，绘制标准曲线；其中，所述流动相为乙腈：水以体积比1：1配制；

（2）样品的采集与前处理

（a）采集地面水的样品，加亚硫酸钠，并用盐酸调节至PH≤2，4℃冷藏保存；

（b）将所得步骤（a）中的样品经 0.45μｍ滤膜减压过滤；

（c）用甲醇、二氯甲烷按照1:1的体积比配制活化溶液，并用该活化溶液对C₁₈反相固相萃取柱进行活化，其中，活化溶液的体积为所述步骤（a）中样品的2%；将步骤（b）所得滤液以 5～10 mL /min的流速过处理后的C₁₈反相固相萃取柱进行富集浓缩；

（d）用纯水淋洗步骤（c）所得样品，再用氮气吹干固相萃取柱后，以1mL /min、体积为步骤（a）中样品的2%二氯甲烷对固相萃取柱进行洗脱，洗脱液收集于浓缩瓶内，氮吹浓缩至步骤（a）中样品体积的2%定容并经针头过滤器过滤保存；

（3）对步骤（2）制得标准溶液在如下条件下进行分析：

（a）色谱条件

色谱柱温：27°C；        

流动相：水/乙腈梯度淋洗；      

流速：0.6mL/min；

检测器：质谱三重四极杆串联；

色谱柱：Restek PAH色谱柱 （2.1×100mm，3μm）；

进样量：10μL，外标法定量；

（b）电离方式：APPI（Positive），多重反应监测模式（MRM），驻留时间100 ms，温度（TEM）350℃；

（4）质谱分析

进行质谱分析，具体质谱分析的条件如下：

扫描方式：正离子扫描；

检测方式：单/多反应模式监测（MRM）；