[发明专利]一种表达人抗体全基因的慢病毒载体(Lentiviral Vector)及其方法

权利要求书

1.一种表达人抗体全基因的慢病毒载体系统，其特征在于，利用AAV2/1穿梭表达载体pLVX-Puro Vector构建而成。

2.如权利要求1所述的慢病毒载体系统，其特征在于该载体构建元件组成依次是：5′LTR--PBS--ψ--RRE--cPPT--promoter1--murine IgG1signal peptide--L--promoter2--murine IgG1signal peptide--H--WPRE--3′LTR--PUC ori---Ampicillin resistance。

3.如权利要求2所述的慢病毒载体系统，其特征在于：所述的promoter1为：hCMVIEpromoter；所述的promoter2为hCMVIEpromoter。

4.如权利要求3所述的慢病毒载体系统，其特征在于，该载体为pLVX/cLcH，所表达的抗体为HIV人中和抗体2G12全基因。

5.一种构建表达人抗体全基因的慢病毒载体系统，其具体构建方法为：

1)通过PCR的方法改造pLVX载体，并在载体pLVX的多克隆位点插入linker；

2)利用PCR技术扩增出murine IgG1signal peptide和目的抗体的轻链、hCMV IE promoter、murine IgG1 signal peptide和目的蛋白的重链、WPRE等基因结构单元；

3）利用酶切位点将步骤2）中各结构单元顺次连接，克隆到改造好的pLVX载体的多克隆位点中，形成5′LTR--PBS--ψ--RRE--cPPT--promoter1--murine IgG1 signal peptide--L--promoter2--murine IgG1 signal peptide--H--WPRE--3′LTR--PUC ori---Ampicillin resistance的基因结构单元；

4)即得到慢病毒载体系统。

6.权利要求5所述的方法，其特征在于步骤4）中所述的载体为权利要求4所述的pLVX/cLcH。