[发明专利]一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法

权利要求书

1.一种地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）对洗净晾干的地骨皮，粉碎后依次采用石油醚、氯仿与甲醇，分别加热进行2～3次回流提取，获得除去油脂成分与弱极性成分的甲醇提取物；

（2）对甲醇提取物进行柱层析分离制备，包括：硅胶柱层析、聚苯乙烯基小孔树脂柱层析粗分离得到4种粗产物、再分别经过反相C₁₈硅胶柱层析精制，收集后减压浓缩，冷冻干燥后分别获得如下通式的化合物A、B、C和D；

A，R₂=H，R₃=-CH₂OH；

B，R₂=H，R₃=-CH₂OH；

C，R₃=-CH₂OH；

D，R₂=H，R₃=-CH(CH₃)CH₂CH₃。

2.根据权利要求1所述的地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）所述的氯仿用二氯甲烷代替。

3.根据权利要求1或2所述的地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）具体过程如下：

地骨皮粉碎后，按照体积质量比2～3mL/g地骨皮加入30～60℃沸程石油醚，55～65℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时；石油醚提取后的地骨皮残渣置于通风处或者真空干燥器中除尽石油醚，然后按照体积质量比2～3mL/g地骨皮残渣加入氯仿或二氯甲烷，65～75℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时，氯仿或二氯甲烷提取后的地骨皮残渣置于通风处或真空干燥器中除尽氯仿或二氯甲烷，然后按照体积质量比2～3mL/g地骨皮残渣加入甲醇，65～75℃水浴加热连续回流提取2～3次，回流时间4～5小时，合并提取液，回收溶剂，回收溶剂后得浸膏，此为地骨皮甲醇提取物。

4.根据权利要求3所述的地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，步骤（1）中地骨皮粉碎至30目。

5.根据权利要求1所述的地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，步骤（2）具体过程如下：

运用硅胶柱层析，上样后以氯仿:甲醇:水=70:30:5为洗脱液淋洗，收集第15～20倍柱体积的馏分，于40～50℃下减压浓缩，蒸干备用；然后利用聚苯乙烯基小孔树脂柱层析粗分离，上样后以甲醇:水体系梯度洗脱，甲醇从40%到100%变化，梯度间隔10%，每个梯度使用4倍柱体积，分别收集甲醇为40%，50%，60%与80%时的馏分，分别于40～50℃下减压浓缩，蒸干，获得粗产品1、2、3与4；最后，将获得的四种粗产品分别进行反相C₁₈硅胶柱层析精制，同样采用甲醇:水体系进行梯度洗脱，梯度间隔5%，每个梯度使用2倍柱体积，对于粗产品1收集甲醇为35%的馏分，对于粗产品2收集甲醇为40%的馏分，对于粗产品3收集甲醇为50%的馏分，对于粗产品4收集甲醇为70%的馏分，分别于40～50℃下减压浓缩，冷冻干燥后分别获得环肽类化合物A、B、C和D。

6.根据权利要求1或5所述的地骨皮中环肽类化合物的制备方法，其特征在于，所述的聚苯乙烯基小孔树脂包括MCI Gel CHP20P树脂。