[发明专利]一种LKB1mRNA检测方法、试剂盒及基因芯片

权利要求书

1.一种LKB1mRNA检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

制备LKB1mRNA原位杂交探针；

用量子点标记LKB1mRNA原位杂交探针，得到量子点LKB1mRNA原位杂交探针；

用量子点LKB1mRNA原位杂交探针与标本进行原位杂交；

将杂交后的标本置于显微镜下观察，

其中，所述的LKB1mRNA原位杂交探针为一段与LKB1mRNA特异性结合的单链DNA或单链RNA；所述的标本为细胞标本或组织标本，所述的细胞标本为组织印片、细胞爬片或细胞涂片，所述的组织标本为石蜡切片或冰冻切片。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述的用量子点标记LKB1mRNA原位杂交探针包括以下步骤：

将量子点表面用COOH和OH进行修饰，得到OH/COOH-量子点；

将LKB1mRNA原位杂交探针用氨基修饰，得到氨基-LKB1mRNA原位杂交探针；

OH/COOH-量子点与氨基-LKB1mRNA原位杂交探针反应，得到量子点LKB1mRNA原位杂交探针。

3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的将量子点表面用COOH和OH进行修饰的步骤为：

在DHLA与巯基乙醇的混合液中加入量子点进行反应，得到第一反应液；

在第一反应液中加入氯仿，再离心，收集沉淀；

将所得沉淀用水溶解，得到第二液体；

将第二液体过滤，得到OH/COOH-量子点。

4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述的OH/COOH-量子点与氨基-LKB1mRNA原位杂交探针反应步骤为：

将EDC与sulfo-NHS溶于磷酸缓冲液，再加入OH/COOH-量子点，反应，得到第三反应液；

在第三反应液中加入氨基-LKB1mRNA原位杂交探针，反应，得到第四反应液；

将第四反应液进行层析，得到量子点LKB1mRNA原位杂交探针。

5.根据权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于，所述的LKB1mRNA原位杂交探针为LKB1基因cDNA、LKB1基因cRNA或靶向LKB1mRNA的特异性寡核苷酸序列。

6.一种LKB1mRNA检测试剂盒，其特征在于，包括量子点LKB1mRNA原位杂交探针。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于，还包括缓冲液、打孔液、消化液、洗涤液和预杂交工作液。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述的洗涤液包括第一洗涤液、第二洗涤液和第三洗涤液。

9.一种LKB1mRNA检测基因芯片，其特征在于，通过将量子点LKB1mRNA原位杂交探针固定在固相载体表面形成。

10.根据权利要求9所述的基因芯片，其特征在于，所述的固相载体选自硝酸纤维素膜、尼龙膜、聚苯乙烯、玻璃片、硅片、微粒或塑料片。