[发明专利]一种从泡桐叶中提取高纯度熊果酸的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取药用活性单一化合物的方法，具体涉及一种从泡桐叶中提取高纯度的可供注射用的熊果酸晶体的方法。

背景技术

熊果酸是存在于天然植物中的一种三萜类化合物，具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖等多种生物学效应，熊果酸还具有明显的抗氧化功能，因而被广泛地用作医药和化妆品原料。熊果酸在自然界中分布广泛，存在多种植物中，例如女贞、枇杷、山楂、泡桐等。与其他植物（如女贞，枇杷等）相比，熊果酸在泡桐叶中含量虽然适中，但泡桐分布广泛，且泡桐主要作为木材用树，其叶成本低廉、收集方便，适于大规模生产，所以在成本上比其他植物要低一些。从植物中提取熊果酸的方法较多，有回流提取法、酶解法、超声提取法、常温超高压提取法、湿法超微粉碎法，渗漉法等，在诸多方法中，采用溶剂回流提取方法简便，且工艺稳定，适于连续生产，但在使用有机溶剂回流提取时，常引入石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇等成分，这些物质有一定的毒性，熊果酸中一旦有这些有机溶剂的残留，在作为药物尤其是注射用药物应用于人体及动物体内时，则将引起不可预测的生理反应，另外，有报道使用大孔树脂分离提纯熊果酸，因大孔树脂作为高分子材料，其中引入的不可知杂质更多，所生产得到的熊果酸也不适用于医药产品。

对于熊果酸的提取，有相关专利报道，例如，专利CN1453289公开了一种从植物中提取分离熊果酸的方法，该方法以泡桐叶为原料。所用的提取溶剂为甲醇，提取物用丙酮洗涤，所得熊果酸中有甲醇、丙酮残余，对熊果酸造成污染，不适合用于医药产品。专利CN101205248公开了以泡桐叶为原料制备熊果酸的方法，该方法用大孔树脂提取熊果酸，引入未知杂质，也不适合用于医药产品。专利CN1629180A公开了一种酸碱法制备熊果酸的方法，该方法的原料没有涉及分布广泛、价廉易得的泡桐叶，且所得的熊果酸的纯度不能满足药用的要求。

发明内容

本发明针对现有技术中存在的不足，提供了一种从泡桐叶中提取高纯度熊果酸的方法，该方法所得熊果酸纯度高、晶型稳定，不引入外源性杂质，安全性高，可以直接用于医药产品。

本发明技术方案如下： 

一种从泡桐叶中提取高纯度熊果酸的方法，其特征是包括以下步骤：

（1）    将泡桐叶粉碎，用乙醇回流提取两次，合并提取液回收至无醇味，得提取物；

（2）    向提取物中加入水，加热至沸腾，使提取物形成混悬液，然后在室温下静置，倒出上清液，留下层水沉物待用；

（3）    向水沉物中加入乙醇，加热至溶，保持溶液温度为40-70℃，用氢氧化钠水溶液调节pH至9.0-11.0，过滤除去沉淀，然后用盐酸调节pH至1.0-3.0，过滤取沉淀物；将沉淀物再按照上述乙醇溶解、氢氧化钠调pH、盐酸调pH步骤处理一遍，得沉淀物质；

（4）    将沉淀物质用乙醇溶解，加入活性炭脱色，脱色后将溶液在15-30℃下析晶，过滤，收集晶体，即为熊果酸。

本发明方法所用的泡桐叶可以是兰考泡桐(P. elongata)、毛泡桐(P.tomentosa)、白花泡桐(P.fortunei)或川泡桐(P.fargesii)的叶。

本发明泡桐叶在提取时要进行粉碎，粉碎的泡桐叶中，大于10mm×10mm的碎片含量应低于5%。

上述步骤（1）中，乙醇体积浓度为85~95%，乙醇与泡桐叶的重量比为6:1~12:1，优选的，乙醇体积浓度为95%，乙醇与泡桐叶的重量比为10:1。

上述步骤（1）中，每次提取2h。

上述步骤（2）中，加入水将提取物中的可溶性杂质除去，水的加入量为提取物质量的20-25倍，优选为20倍。

上述步骤（3）中，氢氧化钠水溶液浓度为0.1~2mol/L，盐酸浓度为0.1~2mol/L，在调节溶液碱性时，应该保持温度在40-70℃之间，从而提高熊果酸得率，优选的，保持溶液温度为60℃。

上述步骤（3）中，水沉物用体积浓度80-85%的乙醇溶解，乙醇的用量为水沉物质量的20-25倍，优选20倍。

上述步骤（3）中，优选用氢氧化钠调节溶液pH为11.0，用盐酸调节pH为2.0。

上述步骤（4）中，沉淀物质用体积浓度90%以上的乙醇溶解，乙醇的温度为50-80℃。

上述步骤（4）中，活性炭用量为沉淀物质质量的1%-5%，活性炭脱色次数为2-5次。活性炭脱色可以提高熊果酸的质量，使熊果酸更易于析晶，提高熊果酸的得率，如果不进行脱色产品很难析晶，其中活性炭用量2%，脱色3次的效果最好，产品得率高。