[发明专利]一种黄芩毛状根保藏和复壮方法有效
| 申请号: | 201210555771.8 | 申请日: | 2012-12-19 |
| 公开(公告)号: | CN103039436A | 公开(公告)日: | 2013-04-17 |
| 发明(设计)人: | 施春阳;齐香君;钱卫东;李雅 | 申请(专利权)人: | 陕西科技大学 |
| 主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
| 代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 汪人和 |
| 地址: | 710021 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 黄芩 毛状根 保藏 复壮 方法 | ||
1.一种黄芩毛状根的保藏和复壮方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)挑选处于对数生长期的黄芩毛状根,接种入保藏培养基中,室温下,避光静置保藏;所述的保藏培养基pH为5.5~6.5,包括1~4g·L-1蔗糖、0.5~2.0mg·L-1甘氨酸、0.5~1.0mg·L-1盐酸硫胺素、0.1~0.5mg·L-1盐酸吡哆醇、0.1~1.0mg·L-1烟酸和10~100mg·L-1肌醇,以及无机盐部分;
2)取保藏培养的黄芩毛状根,接种到活化培养基中,在25~28℃、避光震荡或摇瓶培养20~25天;所述的活化培养基pH为5.5~6.5,包括10~30g·L-1蔗糖、100~500mg·L-1水解乳蛋白、0.5~2.0mg·L-1甘氨酸、0.5~1.0mg·L-1盐酸硫胺素、0.1~0.5mg·L-1盐酸吡哆醇、0.1~1.0mg·L-1烟酸和10~100mg·L-1肌醇,以及无机盐部分;
3)取活化后的黄芩毛状根,接种入复壮培养基中,在25~28℃、避光震荡或摇瓶培养20~25天;所述的复壮培养基pH为5.5~6.5,包括0.1~0.4mmol·L-1苯丙氨酸、30~60g·L-1葡萄糖、500~1000mg·L-1水解乳蛋白、1.0~4.0mg·L-1甘氨酸、0.5~2.5mg·L-1盐酸硫胺素、0.5~1.5mg·L-1盐酸吡哆醇、0.5~2.0mg·L-1烟酸和50~200mg·L-1肌醇,以及无机盐部分;
所述的无机盐部分包括:50~150mg·L-1KH2PO4、500~2000mg·L-1KNO3、100~300mg·L-1MgSO4·7H2O、200~500mg·L-1CaCl2·2H2O、10~30mg·L-1Na2EDTA·2H2O、1~5mg·L-1H3BO3、5~20mg·L-1FeSO4·7H2O、0.01~0.05mg·L-1CuSO4·5H2O、2~10mg·L-1ZnSO4·7H2O、0.1~0.5mg·L-1Na2MoO4·2H2O、0.01~0.05mg·L-1CoCl2·6H2O、0.2~0.5mg·L-1KI和5~20mg·L-1MnSO4·4H2O。
2.如权利要求1所述的黄芩毛状根的保藏和复壮方法,其特征在于,所述的对数生长期的黄芩毛状根的获得为:
将挑选的黄芩毛状根的根尖部,接种入液体培养基,在25~28℃、避光震荡或摇瓶培养至对数生长期;所述的液体培养基pH为5.5~6.5,包括30~50g·L-1蔗糖,300~1000mg·L-1水解乳蛋白,0.5~4.0mg·L-1甘氨酸、0.5~2.5mg·L-1盐酸硫胺素、0.5~1.5mg·L-1盐酸吡哆醇、0.5~2.0mg·L-1烟酸和50~200mg·L-1肌醇,以及无机盐部分。
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