[发明专利]可的松-RGD多肽缀合物，其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及的松-RGD多肽缀合物，其制备方法及应用，属于生物医药领域。

背景技术

数千年前，人们就曾设想用正常的器官组织来置换病变的器官组织，但20世纪前的移植除角膜移植外，大部分是失败的。直到20世纪40年代，英国外科医生Mdewaar应用家兔皮肤移植的实验模型，初次论证了器官组织移植中出现的排斥反应本质上是一种免疫应答反应，从而奠定了移植免疫学的基础。80年代以后，有效的免疫抑制剂如环抱素A及FK506等的发现及应用，使移植器官的存活时间进一步延长，但是由于临床用药普遍存在易降解，生物利用度低，脂溶性差，难以透过生物膜等缺点，所以亟待研究药剂纳米包材去改善这些不足之处。

两亲性化合物因其能自组装成明确的纳米纤维结构而受到广泛重视，从纳米技术到组织工程，在许多领域得到应用。而且由于两亲性化合物化学结构的多样性和易于合成，必将成为生物医药和生物材料领域新的研究热点。可的松作为免疫抑制剂在临床上已经广泛使用，但其具有骨质疏松等一系列副作用。

基于甾体和多肽缀合后的缀合激素具有允许效应，可以增强甾体激素的活性，并且这种修饰可能得到活性更好，毒性更低的新化合物，发明人提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的是，提供如通式i的3种可的松-RGD多肽缀合物。

其中，RGDX为四肽Arg-Gly-Asp-X，所述X=Val，Ser，Phe三种氨基酸中的任意一种，通式i中的X=Val时为化合物8a，X=Ser时为化合物8b，X=Phe时为化合物8c。

本发明的第二个目的是，提供如通式i的3种可的松-RGD多肽缀合物的制备方法，其中通式i的3种可的松-RGD多肽缀合物合成中四肽的合成路线如下（以X=Val为例）：

上述合成路线中，i)DCC，NMM，HOBt；ii)CH₃OH，2N NaOH；iii)4N HCl/EtOAc；iv)CF₃COOH，TFMSA。

通式i的3种可的松-RGD多肽缀合物的合成路线如下所示：

上述合成路线中，i)丁二酸酐，DMAP；ii)EDC·HCl，HOSu；iii)DMF，H₂O，NMM，RGDV/F/S。

其制备方法，具体包括以下步骤：

(1)在无水THF（四氢呋喃）中，在DCC（N,N-二环己基碳二亚胺）、HOBt（1-羟基苯并三唑）和N-甲基吗啉存在下将N-叔丁氧羰基-硝基精氨酸与甘氨酸苄酯或其盐（优选其对甲苯磺酸盐）缩合，生成N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酸苄酯；

(2)在冰水浴中，在2N的NaOH存在下将N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酸苄酯脱除苄酯保护基，生成N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酸；

(3)在无水THF中，在DCC、HOBt和N-甲基吗啉存在下将N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酸与缬氨酸苄酯或其盐（优选其对甲苯磺酸盐）或苯丙氨酸苄酯或其盐（优选其对甲苯磺酸盐）或丝氨酸-苄醚苄酯或其盐（优选其盐酸盐）缩合，生成N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰缬氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯；

(4)在氯化氢-乙酸乙酯中将N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰缬氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-苄基天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯脱除叔丁氧羰保护基，生成苄基-天冬氨酰缬氨酸苄酯或苄基-天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或苄基-天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯的盐酸盐；

(5)在无水THF中，在DCC、HOBt和N-甲基吗啉存在下将N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酸与苄基-天冬氨酰缬氨酸苄酯或苄基-天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或苄基-天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯的盐酸盐缩合，生成N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰-苄基天冬氨酰缬氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰苄基-天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰-苄基天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯；

(6)在三氟醋酸-三氟甲磺酸存在下将N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰-苄基天冬氨酰缬氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰苄基-天冬氨酰苯丙氨酸苄酯或N-叔丁氧羰基-硝基精氨酰甘氨酰-苄基天冬氨酰丝氨酸苄醚苄酯脱除叔丁氧羰基、苄基、苄醚和硝基，生成精氨酰甘氨酰天冬氨酰缬氨酸或精氨酰甘氨酰天冬氨酰苯丙氨酸或精氨酰甘氨酰天冬氨酰丝氨酸。