[发明专利]鉴定小菜蛾钠离子通道基因突变的方法及专用引物

权利要求书

1.引物组合物，由引物组合物甲和引物组合物乙组成；

所述引物组合物甲由序列表的序列1所示的单链DNA分子、序列表的序列2所示的单链DNA分子、序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子组成；

所述引物组合物乙由序列表的序列6所示的单链DNA分子、序列表的序列7所示的单链DNA分子、序列表的序列8所示的单链DNA分子、序列表的序列9所示的单链DNA分子和序列表的序列10所示的单链DNA分子组成。

2.权利要求1所述引物组合物在如下（a）和（b）中的应用：

（a）鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第12992位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型；

（b）鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第14197位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型。

3.权利要求1所述引物组合物在制备试剂盒中的应用；所述试剂盒的用途为如下（a）和（b）：

（a）鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第12992位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型；

（b）鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第14197位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型。

4.引物组合物甲，由序列表的序列1所示的单链DNA分子、序列表的序列2所示的单链DNA分子、序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子组成。

5.权利要求4所述引物组合物甲在鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第12992位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型中的应用。

6.一种鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第12992位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型的方法，包括如下步骤：以待测小菜蛾的基因组DNA为模板，用序列表的序列1所示的单链DNA分子、序列表的序列2所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子进行第一组荧光定量PCR，用序列表的序列3所示的单链DNA分子、序列表的序列4所示的单链DNA分子和序列表的序列5所示的单链DNA分子进行第二组荧光定量PCR，如果第一组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间具有1个峰且第二组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间不具有峰待测小菜蛾为CC基因型，如果第二组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间具有1个峰且第一组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间不具有峰待测小菜蛾为TT基因型，如果第一组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间具有1个峰且第二组荧光定量PCR的溶解曲线在75-80℃之间具有1个峰待测小菜蛾为CT基因型。

7.引物组合物乙，由序列表的序列6所示的单链DNA分子、序列表的序列7所示的单链DNA分子、序列表的序列8所示的单链DNA分子、序列表的序列9所示的单链DNA分子和序列表的序列10所示的单链DNA分子组成。

8.引物组合物乙在鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第14197位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型中的应用。

9.一种鉴定小菜蛾对于钠离子通道基因自5’末端第14197位核苷酸为CC基因型、TT基因型还是CT基因型的方法，包括如下步骤：以待测小菜蛾的基因组DNA为模板，用序列表的序列6所示的单链DNA分子、序列表的序列7所示的单链DNA分子和序列表的序列10所示的单链DNA分子进行第一组荧光定量PCR，用序列表的序列8所示的单链DNA分子、序列表的序列9所示的单链DNA分子和序列表的序列10所示的单链DNA分子进行第二组荧光定量PCR，如果第一组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间具有1个峰且第二组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间不具有峰待测小菜蛾为CC基因型，如果第二组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间具有1个峰且第一组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间不具有峰待测小菜蛾为TT基因型，如果第一组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间具有1个峰且第二组荧光定量PCR的溶解曲线在70-80℃之间具有1个峰待测小菜蛾为CT基因型。

10.权利要求6和8所述方法在鉴定小菜蛾对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性中的应用，或权利要求1所述引物组合物在鉴定小菜蛾对拟除虫菊酯杀虫剂的抗性中的应用。