[发明专利]一种原子转移自由基聚合修饰的金属丝固定化酶反应器的制备方法有效
申请号: | 201210537190.1 | 申请日: | 2012-12-12 |
公开(公告)号: | CN103865917A | 公开(公告)日: | 2014-06-18 |
发明(设计)人: | 钱小红;张养军;周廉淇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院放射与辐射医学研究所 |
主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14;C12N11/08;C08F292/00;C08F220/32;C08F8/32 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;任凤华 |
地址: | 100850*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 原子 转移 自由基 聚合 修饰 金属丝 固定 反应器 制备 方法 | ||
1.一种固定化酶反应器的制备方法,包括如下步骤:
(1)制备一端为巯基,另一端为原子转移自由基聚合引发基团的引发剂;
(2)利用巯基与金属丝结合的特性,将所述引发剂固定在所述金属丝表面;
(3)在所述引发剂的作用下,利用甲基丙烯酸缩水甘油酯单体的原子转移自由基聚合反应,使所述金属丝表面固定上环氧基团;
(4)利用乙二胺使所述环氧基团发生开环反应并暴露氨基;
(5)利用所述氨基与戊二醛反应,使所述金属丝表面修饰上醛基;
(6)利用所述醛基与蛋白酶的氨基反应,进而将蛋白酶固定到所述金属丝表面;
(7)利用含有氨基的化合物对步骤(6)中剩余的醛基进行封闭,从而获得所述金属丝固定化酶反应器。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述金属丝为能与巯基发生络合反应的金属丝。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述金属丝为如下中任一:银、金、铜。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法,其特征在于:步骤(1)中,所述引发剂由11-巯基-1-十一烷醇与2-溴异丁酰溴反应产生。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述反应中,所述11-巯基-1-十一烷醇与所述2-溴异丁酰溴的配比为0.3g:164μL。
6.根据权利要求4或5所述的方法,其特征在于:所述反应的催化剂为吡啶;或
所述反应的液体环境为四氢呋喃;或
所述反应在无氧条件下进行。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:步骤(3)中,所述甲基丙烯酸缩水甘油酯单体的原子转移自由基聚合反应,催化剂为过渡金属卤化物;或
步骤(3)中,所述甲基丙烯酸缩水甘油酯单体的原子转移自由基聚合反应,配体为1,1,4,7,7-五甲基二亚乙基三胺。
8.根据权利要求1-7中任一所述的方法,其特征在于:步骤(6)中,所述蛋白酶为胰蛋白酶。
9.根据权利要求1-8中任一所述的方法,其特征在于:步骤(7)中,所述含有氨基的化合物为氨基乙醇。
10.利用权利要求1-9中任一所述的方法制备得到的固定化酶反应器。
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