[发明专利]鲍曼不动杆菌特异性卵黄免疫球蛋白的制备方法、应用及药物组合物、制剂和试剂盒

权利要求书

1.一种鲍曼不动杆菌特异性卵黄免疫球蛋白的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

（1）调制抗原液

将鲍曼不动杆菌菌种接种于TSB液体培养基中，37℃培养18-24h后，离心收集菌体，菌体以生理盐水稀释至10⁸-10¹⁰cfu/mL，向菌液中加入菌液体积0.5%的甲醛，37℃灭活24h，不时摇动，经无菌检验合格后分别加入等体积的弗氏完全佐剂或弗氏不完全佐剂，充分乳化后制成全菌灭活疫苗，4℃保存；

（2）免疫母鸡

选用140-160日龄的产蛋母鸡，于每只鸡胸肌注射2点、颈部皮下注射1点进行免疫，共免疫三次，首次免疫的疫苗为加入弗氏完全佐剂的抗原液，加强免疫的疫苗为加入弗氏不完全佐剂的抗原液，三次免疫剂量递增，分别为每只鸡1.0mL、1.5mL和2.0mL，每次免疫间隔14天，收集首次免疫后1-160天的鸡蛋于4℃分类保存；

（3）分离、纯化卵黄免疫球蛋白

取免疫鸡蛋，擦洗消毒，去蛋壳，用蛋黄分离器去除蛋白，而后用无菌滤纸进一步吸取蛋白，刺破蛋黄膜收集蛋黄，卵黄液加6-10倍体积的去离子水稀释，用盐酸调pH至5.0，搅匀后4℃放置过夜，在4℃下10000rpm离心25min，取上清液，进行盐析后，盐析溶液经超滤、冷冻干燥得冻干粉。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌菌种为市售的鲍曼不动杆菌标准菌。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌菌种为医院分离获得的多药耐药性鲍曼不动杆菌。

4.权利要求1-3中任意一项制备的鲍曼不动杆菌特异性卵黄免疫球蛋白在制备用于防治或分析诊断鲍曼不动杆菌感染性疾病的药物中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌感染性疾病为鲍曼不动杆菌感染性的呼吸道感染、菌血症、泌尿系统感染、伤口感染、脑膜炎、腹膜炎、心内膜炎、眼内炎中的一种或两种以上。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述鲍曼不动杆菌感染性疾病为鲍曼不动杆菌感染性肺炎或菌血症。

7.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含权利要求1-3中任意一项制备的鲍曼不动杆菌特异性卵黄免疫球蛋白和药学上可接受的辅料。

8.一种由权利要求7所述的药物组合物制备得到的制剂，其特征在于，所述制剂为口服制剂、注射制剂或外用制剂。

9.一种试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求1-3中任意一项制备的鲍曼不动杆菌特异性卵黄免疫球蛋白。