[发明专利]一种提高彩色马蹄莲组织培养丛生芽增殖率的方法

说明书

技术领域

本发明涉及提高彩色马蹄莲丛生芽增殖率方法，属植物的人工繁殖技术领域。 

背景技术

彩色马蹄莲(Zantedesehia hybrida)属天南星科(Araceae)马蹄莲属(Zantedeschia Spreng)植物，原产自非洲东南部，其佛焰苞有橘红、玫红、紫红、鲜黄等颜色，与传统的白色马蹄莲相比，具有花色品种多、花色艳丽、观赏性强等优点，既可作为切花，又可作为盆花。多数彩色马蹄莲叶片带月白色斑点或条纹，是具有较高观赏价值的配叶材料。由于彩色马蹄莲花、叶俱佳，其市场潜力较大，近年来在国内外花卉市场占有越来越重要的地位。 

彩色马蹄莲多采用组织培养的方法进行快速繁殖，既可以加快种苗繁育进程，又可以起到提纯复壮的作用，是实现产业化生产和栽培的有效途径。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种提高彩色马蹄莲丛生芽增殖率的方法，以满足对彩色马蹄莲规模化生产以及育种为基础的其他方面的研究工作的需要。 

本发明的技术方案如下，该种提高彩色马蹄莲丛生芽增殖率方法的主要特点是： 

A外植体消毒：选取直径约2cm的健康的彩色马蹄莲小种球，用2g/L多菌灵水溶液浸泡15min后，浅埋于经高压灭菌处理的湿润的细沙基质中，在光照3000lx、12h/d、(25±1)℃的条件下进行预培养，令种球萌发；7～10d后，选取芽长约1cm的种球，经表面消毒后接种。具体消毒方法为：用软毛刷将块茎刷洗干净，避免损伤顶芽，削去块茎表皮，在安利洗涤剂溶液中振 荡洗涤20min，再用2g/L多菌灵溶液浸泡1h，自来水冲洗40min，转入超净台，切除块茎表层，保留直径约1.5cm的带芽块茎，75％酒精浸泡15s，无菌水冲洗1次，再用0.2％的升汞进行15～20min的消毒，无菌水冲洗6～8次，无菌吸水纸吸干水分。 

B芽诱导培养：将消毒好的彩色马蹄莲种球切成直径约1cm的带芽小块，接种至下列培养基中：MS基本培养基，蔗糖30g/L，生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；在培养温度25±1℃，光照强度为1000～3000lx，光照时间为12～16h下进行光照培养20～30天至分化出芽。 

C ⁶⁰Coγ射线辐射处理：将分化出芽的组培苗分切继代后，连瓶于⁶⁰Coγ射线下进行40Gy，0.5h辐射照射，然后接种到以下培养基中：MS基本培养基，蔗糖30g/L，植物生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为1000～3000lx，光照时间为12～16h，进行光照培养25～30天。 

D丛生芽的培养：将生长至6～8cm左右的丛生芽分切，在以下培养基中进行继代培养：MS基本培养基，蔗糖30g/L，植物生长激素0.1～0.2mg/L，细胞分裂素0.4～0.5mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为1000～3000lx，光照时间为12～16h，进行光照培养20～30天。 

E生根培养：选取健壮的试管苗，经过修剪后，接种到如下培养基中：MS基本培养基，蔗糖30g/L，植物生长激素1.0～2.0mg/L，细胞分裂素0.15～0.2mg/L，pH5.8；培养温度25±1℃，光照强度为1000～3000lx，光照时间为10～16h，进行光照培养20～30天至成苗。 

F炼苗移栽：将组培瓶从培养室取出，在缓冲间将瓶盖打开，进行有菌条件驯化3～5d；后用镊子将组培苗从瓶中取出，用500～800倍多菌灵浸泡 20m左右，洗净后移栽到基质(泥炭土∶珍珠岩∶沙＝2∶2∶1)中进行栽培。所述的提高彩色马蹄莲丛生芽增殖率方法的延伸技术方案包括：步骤A中的消毒试剂和时间、步骤B中的培养基和培养条件、步骤C中的辐射条件以及步骤B、C、D、E中彩色马蹄莲快速繁殖所述的培养基中涉及的植物生长激素和细胞分裂素，包括6-卞基腺嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)、萘乙酸(NAA)其中的一种或几种。 

所述的提高彩色马蹄莲丛生芽增殖率方法的延伸技术方案包括：步骤A中的种球消毒用2g/L多菌灵水溶液浸泡15min后，浅埋于经高压灭菌处理的湿润的细沙基质中，在光照3000lx、12h/d、(25±1)℃的条件下进行预培养，令种球萌发，然后采用0.1％的安利洗涤液在摇床上震荡洗涤20min、2g/L多菌灵溶液浸泡1h和0.2％升汞灭菌10～20min。