[发明专利]制备高纯度赛门苷Ⅰ的方法无效
申请号: | 201210526355.5 | 申请日: | 2012-12-07 |
公开(公告)号: | CN102942611A | 公开(公告)日: | 2013-02-27 |
发明(设计)人: | 李晓波;王梦月;邢世华;黄文武;沈潇男 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C07J17/00 | 分类号: | C07J17/00 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 制备 纯度 赛门苷 方法 | ||
1.一种制备高纯度赛门苷Ⅰ的方法,其特征在于,通过将罗汉果水煮后的上清液通过大孔树脂吸附后经减压洗脱得到浸膏,将浸膏溶解,取上清液上ODS柱,洗去杂质后得到赛门苷Ⅰ粗品,再将粗品进行Sephadex LH-20柱层析,经乙醇梯度洗脱后进行HPLC检测并合并含赛门苷Ⅰ的流份,最后回收溶剂即得赛门苷Ⅰ精制品。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是,所述方法具体步骤包括:
1)将罗汉果粉碎成粗粉加水煎煮后离心处理并收集上清液;
2)将步骤1)得到的上清液通过大孔树脂吸附后,用40%(v/v)酒精洗去杂质,然后用60-80%(v/v)酒精洗脱,最后从洗脱液中回收乙醇并得到浸膏;
3)将浸膏用60%(v/v)酒精溶解、离心,取上清液上ODS柱,先用60%(v/v)酒精洗去杂质,然后采用70-90%(v/v)酒精洗脱;最后从洗脱液中回收乙醇并进行HPLC检测,合并含赛门苷Ⅰ的流份得到赛门苷Ⅰ粗品;
4)将赛门苷Ⅰ粗品进行Sephadex LH-20柱层析,经乙醇梯度洗脱后进行HPLC检测并合并含赛门苷Ⅰ的流份,最后回收溶剂即得赛门苷Ⅰ精制品。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征是,所述的加水煎煮中,水的用量为粗粉重量的6-12倍;煎煮时间为0.5-1h。
4.根据权利要求1或2或3所述的方法,其特征是,所述的上清液为将第一次收集后的残余物重复上述加水煎煮和离心处理后合并两次处理的上清液。
5.根据权利要求2所述的方法,其特征是,所述的酒精洗脱的流速为8-10mL/min。
6.根据权利要求2所述的方法,其特征是,所述的乙醇梯度洗脱是指:依次用70%、80%、90%(v/v)酒精(各300mL)梯度洗脱(流速3mL/min),每份30mL进行洗脱。
7.根据权利要求2所述的方法,其特征是,步骤2)和步骤3)中,洗脱液的用量均为大孔树脂的柱体积、ODS柱的1.5-2.5倍。
8.根据权利要求2所述的方法,其特征是,步骤3)和步骤4)中的HPLC检测是指:以ODS柱为色谱柱,设置检测波长为205nm,流动相为乙腈-水25:75(v/v),流速为1.0mL/min。
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