[发明专利]一种卡贝缩宫素的纯化方法无效
| 申请号: | 201210518907.8 | 申请日: | 2012-12-06 |
| 公开(公告)号: | CN102977192A | 公开(公告)日: | 2013-03-20 |
| 发明(设计)人: | 陈阿娜 | 申请(专利权)人: | 安徽工程大学 |
| 主分类号: | C07K7/16 | 分类号: | C07K7/16;C07K1/20;C07K1/18 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 241000 安徽省芜湖市高新区*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 卡贝缩宫素 纯化 方法 | ||
1.一种卡贝缩宫素的纯化方法,包括以下步骤:
①、采用反相离子对液相色谱法分离纯化卡贝缩宫素粗肽:以反相色谱填料为固定相,一定浓度的离子对试剂水溶液为流动相A相,甲醇或乙腈或乙醇为流动相B相,纯化后得到纯度为99.5%以上的精肽;②、采用离子交换色谱法脱除精肽中离子对试剂及其它盐:将精肽溶液调至合适pH,使得卡贝缩宫素结合在离子交换树脂上,用纯水冲洗除去无机盐和大部分离子对试剂,再使用一定比例的乙醇水溶液梯度洗脱,将离子对试剂和卡贝缩宫素分开,得到无盐卡贝缩宫素乙醇水溶液。
2.如权利要求1所述方法,其特征在于:所述反相色谱填料包括C18、C8、C4,但不仅限于C18、C8、C4。
3.如权利要求1所述方法,其特征在于:所述离子对试剂包括R-SO3Na或R-SO4Na,其中R选自甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、十五烷基、十六烷基。
4.如权利要求1或3所述方法,其特征在于:离子对试剂水溶液浓度为0.002-0.100mol/L,流动相A相pH值为1.5-8.0。
5.如权利要求1所述方法,其特征在于:离子交换树脂包括阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。
6.如权利要求1或5所述方法,其特征在于:当采用阳离子交换树脂时,精肽溶液pH值调至1.0-3.5;当采用阴离子交换树脂时,精肽溶液pH值调至5.0-10.0。
7.如权利要求1所述方法,其特征在于:精肽溶液上离子交换柱后,采用梯度洗脱的方法,洗脱相A相为醋酸水溶液,盐酸水溶液,三氟醋酸水溶液,磷酸水溶液,洗脱相B相为甲醇,乙醇。
8.如权利要求1所述方法,其特征在于:收取卡贝缩宫素目的峰,得到卡贝缩宫素。
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