[发明专利]一种节旋藻蛋白的分离纯化方法有效
| 申请号： | 201210516806.7 | 申请日： | 2012-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN103044520A | 公开（公告）日： | 2013-04-17 |
| 发明（设计）人： | 刘冰;秦松;张允允;邵明飞;宋璐非;谷洋洋;朱义松 | 申请（专利权）人： | 中国科学院烟台海岸带研究所 |
| 主分类号： | C07K1/34 | 分类号： | C07K1/34 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 周秀梅;李颖 |
| 地址： | 264003 山*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 节旋藻 蛋白 分离 纯化 方法 | ||
1.一种节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：
步骤1）将藻粉在PBS中充分浸泡，混匀后常温下避光放置24-72小时离心，收集上清液；
步骤2）将上清液经滤膜进行超滤浓缩，浓缩液中加入甲壳胺使混合液pH达到6.5-7.2，并进行搅拌；
步骤3）上述搅拌均匀的混合液离心取上清液，上清液中加入水经滤膜进行超滤浓缩，超滤置换钠离子得到纯化浓缩液；浓缩液喷雾干燥，即得药品级节旋藻蛋白。
2.按权利要求1所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述步骤1）按体积比1：15-30将藻粉在PBS中充分浸泡，混匀后常温下避光放置24-72小时，再以18000-22000g离心20-30分钟，收集上清液。
3.按权利要求1所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述步骤2）将上清液经50KD的滤膜进行超滤浓缩，浓缩液中加入甲壳胺使混合液中甲壳胺终浓度为0.25-0.35％，并用碱调节混合液中pH达到6.5—7.2，同时进行搅拌15-30min是混合液充分混匀。
4.按权利要求3所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述加入碱浓度在40-80g/L；碱为氢氧化钠或氢氧化钾。
5.按权利要求1所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述步骤3）上述搅拌均匀的混合液离心取上清液，上清液中加入其体积2-3倍水经50KD的滤膜超滤浓缩，所得浓缩液再次加入其体积2-3倍水再次进行超滤浓缩，超滤浓缩共进行4-9次，进而充分超滤置换钠离子得到纯化浓缩液；浓缩液喷雾干燥，即得药品级节旋藻蛋白。
6.按权利要求1或5所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述浓缩液喷雾干燥具体为喷雾干燥的进风温度为150-200℃，出风温度为70-90℃。
7.按权利要求1或5所述的节旋藻蛋白的分离纯化方法，其特征在于：所述药品级节旋藻蛋白，其中藻蓝蛋白的纯度大于3.0，含量大于61.5％，别藻蓝蛋白的含量小于3％，其它蛋白的含量小于2％。
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