[发明专利]甾醇基色谱固定相的制备方法

权利要求书

1.一种甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述甾醇基色谱固定相由偶联剂分别与微球形的无机基质填料和甾醇类化合物反应制得，所述偶联剂为具有如下结构通式的异氰酸烷基硅烷：

其中，X为甲基或乙基，m=3～8。

2.根据权利要求1所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述偶联剂先与微球形的无机基质填料反应，然后再与甾醇类化合物反应，具体步骤为：

1)在溶有异氰酸烷基硅烷偶联剂的无水甲苯溶液中加入微球形无机基质填料，惰性氛围下加入三乙胺作为催化剂，100～160℃下回流反应8～24小时，经冷却、抽滤、洗涤、真空干燥，得到异氰酸烷基硅烷偶联剂键合固定相；

2)然后，将异氰酸烷基硅烷偶联剂键合固定相分散于无水甲苯中，惰性氛围下加入甾醇类化合物与吡啶，搅拌溶解后于50～100℃下反应8～24小时，经冷却、抽滤、洗涤、干燥，即得甾醇基色谱固定相。

3.根据权利要求1所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述偶联剂先与甾醇类化合物反应，然后再与微球形的无机基质填料反应，具体步骤为：

1)在溶有甾醇类化合物的无水甲苯溶液中逐滴加入异氰酸烷基硅烷偶联剂，惰性氛围下加入吡啶，在50～100℃下搅拌反应8～24小时；

2)然后，往反应体系中加入微球形无机基质材料，惰性氛围下加入三乙胺作为催化剂，100～160℃下回流反应8～24小时，经冷却、抽滤、洗涤、真空干燥，即得甾醇基色谱固定相。

4.根据权利要求1、2或3所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述甾醇类化合物为胆固醇、谷甾醇、豆甾醇、菜油甾醇和真菌固醇中的一种。

5.根据权利要求1、2或3所述的制备方法，其特征在于：所述无机基质填料为硅胶、氧化锆、氧化钛和氧化铝中的一种。

6.根据权利要求4所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述无机基质填料为硅胶、氧化锆、氧化钛和氧化铝中的一种。

7.根据权利要求1、2或3所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述异氰酸烷基硅烷的用量为1～6mmol/克无机基质填料，异氰酸烷基硅烷与甾醇类化合物的摩尔比为1：1～1：8。

8.根据权利要求6所述的甾醇基色谱固定相的制备方法，其特征在于：所述异氰酸烷基硅烷的用量为1～6mmol/克无机基质填料，异氰酸烷基硅烷与甾醇类化合物的摩尔比为1：1～1：8。