[发明专利]一种吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法

权利要求书

1.一种吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，它包括先从吸血水蛭活体中提取天然水蛭素粗品，然后经过分离纯化得到天然水蛭素粉，其特征在于：所述天然水蛭素粗品的提取是先制备特异性诱导液，并将其灌入肠管中得到含特异性诱导液肠管；再将含特异性诱导液肠管投喂给吸血水蛭，然后提取吸血水蛭的唾液或将吸血水蛭磨浆，制成浆液，即得到天然水蛭素粗品；所述特异性诱导液的制备为：在每1000ml特异性诱导液中含有蚯蚓提取液10～300ml，壳聚糖5～50g，黄芪多糖1～20g，葡萄糖粉1～30g；先用适量水溶解上述粉状物质后，加入蚯蚓提取液，再用水加至1000ml，即得到特异性诱导液，备用。

2.根据权利要求1所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述吸血水蛭唾液的提取将吸饱特异性诱导液后的吸血水蛭静置30～120分钟，然后采用物理挤压的方法提取其体内的唾液即天然水蛭素粗品，待唾液提取完成之后继续按常规的方法对吸血水蛭进行养殖管理，以备供下一次提取天然水蛭素粗品用。

3.根据权利要求1或2所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述吸血水蛭唾液提取的时间间隔为11～60天进行一次，每条水蛭可反复提取天然水蛭素粗品3～5次，每次可得到天然水蛭素粗品8～12ml。

4.根据权利要求1所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述吸血水蛭磨浆制成浆液是指将经过3～5次提取水蛭素粗品之后的吸血水蛭在吸饱特异性诱导液后再进行整体磨浆制浆，并用20～300目的筛网过滤，取其滤液即为水蛭素粗品。

5.根据权利要求1所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述含特异性诱导液肠管的制备是将特异性诱导液灌入新鲜的动物大小肠、动物小肠肠衣或人工肠衣内，灌满后用线扎紧肠管两端使其膨胀，每段肠管长为10～100cm。

6.根据权利要求1或5所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述吸血水蛭的投喂是将饥饿15天以上的吸血水蛭分散放在容器中，然后投放含特异性诱导液肠管，让吸血水蛭吸吮，在10～60分种内吸饱，吸饱后的吸血水蛭其体重增加1～10倍。

7.根据权利要求2或4所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述天然水蛭素粗品中的抗凝血酶活性即水蛭素含量为5～50 AT-U（国际单位）/ml。

8.根据权利要求1所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述蚯蚓提取液，是指将蚯蚓活体或其新鲜冰冻尸体加水，磨浆、过滤得到的滤液。

9.根据权利要求2或4所述的吸血水蛭活体多次提取天然水蛭素方法，其特征在于：所述天然水蛭素粗品分离纯化是指将天然水蛭素粗品装入容器内，置于40～49℃的恒温水浴中隔水加热30～90分钟，取出冷却至常温，然后用160～300目筛网过滤，取其滤液，接着用3000r/min～15000r/min的离心机离心5～30分钟，取其滤液，再用膜分离、透析法、电泳法或层析法常规的生化分离方法对其进行分离纯化得到浓缩液，再加入辅料后进行冷冻干燥后即得到天然水蛭素粉末。