[发明专利]香精香料中四种禁用成分含量的测定方法

权利要求书

1.一种香精香料中四种禁用成分马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的同时测定方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）萃取溶液的配制：称取1g的抗坏血酸加入到1L的容量瓶中，用0.1%的甲酸甲醇-水的混合溶液定容，甲醇与水的体积比为9:1；

（2）标准溶液的配制：用萃取溶液分别配制具有浓度梯度的马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯的标准工作溶液；

（3）样品溶液的制备：使用萃取溶液振荡萃取样品，然后离心过滤制备样品溶液；

（4）液相色谱分析：利用液相色谱仪分别对标准溶液和样品溶液进行检测分析；

（5）香精香料中马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的计算。

2.根据权利要求1所述的香精香料中四种禁用成分马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的同时测定方法，其特征在于：所述标准溶液的配制方法如下：称取马兜铃酸，正二氢愈创酸，水杨酸，邻氨基苯甲酸肉桂酯各50mg(精确至0.1mg)，用萃取溶液溶解转移至50mL容量瓶中，定容至刻度并摇匀，定为第1级标准溶液；

取第1级标准溶液5mL至50mL容量瓶中，用萃取溶液定容至刻度，定为第2级标准溶液；

分别准确移取100μL，300μL, 500μL, 1000μL, 2000μL, 4000μL的第2级标准溶液至50mL容量瓶中，用萃取溶液定容至刻度，得到系列标准工作溶液。

3.根据权利要求1所述的香精香料中四种禁用成分马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的同时测定方法，其特征在于：所述样品溶液的制备方法是称取2g试样于100mL具塞锥形瓶中，准确加入50mL萃取溶液，用150r/min振荡萃取10min，取8mL萃取溶液于10mL具塞离心试管中，在10000r/min转速条件下离心5min,取1mL上清液过有机相滤膜，滤液用高效液相色谱分析仪分析。

4.根据权利要求1所述的香精香料中四种禁用成分马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的同时测定方法，其特征在于：所述的色谱分析条件为色谱柱采用C18液相色谱柱，色谱柱温度为30℃，进样量为10 μL，流速为1.0 mL/min；二级管阵列检测波长：λ= 393 nm；荧光检测器波长：开始时激发波长λ_ex为290nm, 发射波长λ_em为400nm，13min时为λ_ex=280nm，λ_em=306nm，19min时为λ_ex =342nm，λ_em =413nm；流动相：A为0.1%的甲酸乙腈溶液，B为0.1%的甲酸水溶液，采用梯度洗脱程序，即初始A是30％，B为70％，15min时A是50％，B是50％，25min时A是90％，B是10％，28min时A是50％，B是50％，30min时A是30％，B是70％，32min时A是30％，B是70％，总洗脱时间为32min。

5.根据权利要求1所述的香精香料中四种禁用成分马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯含量的同时测定方法，其特征在于：步骤（5）中各成分含量的计算方法如下：首先以标准溶液所检测出的目标物的色谱峰面积对其相应浓度进行回归分析，得到标准曲线；然后将样品溶液检出的目标物的色谱峰面积，代入标准曲线，即得到样品中马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯质量，由此即可计算出香精香料中马兜铃酸、水杨酸、正二氢愈创酸和邻氨基苯甲酸肉桂酯的含量。