[发明专利]阻断H5N1禽流感病毒进入的L-亮氨酸衍生物及其制备方法

权利要求书

1.一种具有抗H₅N₁病毒活性的L-亮氨酸衍生物，为3,4-二羟基苯甲酰亮氨酸甲酯或3,4-二羟基苯乙酰亮氨酸甲酯，结构式分别为：

2.权利要求1所述的3,4-二羟基苯甲酰亮氨酸甲酯的制备方法，其特征在于：

（1）将乙基替-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺的无水二氯甲烷溶液和1-羟基苯并三氮唑的无水二氯甲烷溶液分别加入到3,4-二羟基苯甲酸的无水二氯甲烷溶液中，滴加三乙胺溶液，控制反应温度在0℃，搅拌反应半小时；

（2）另取L-亮氨酸甲酯盐酸盐溶于无水二氯甲烷中，滴加三乙胺溶液并抽滤，再将滤液L-亮氨酸甲酯的二氯甲烷溶液加入到步骤（1）反应液中，缓慢升温至30℃反应6小时；

（3）反应完成后，蒸去二氯甲烷，残余物用乙酸乙酯溶解，再先后用1wt%盐酸溶液、4wt%碳酸氢钠水溶液和蒸馏水洗涤乙酸乙酯层至中性，干燥，并经柱层析得3,4-二羟基苯甲酰亮氨酸甲酯。

3.根据权利要求2所述的3,4-二羟基苯甲酰亮氨酸甲酯制备方法，其特征在于，3,4-二羟基苯甲酸与乙基替-（3-二甲氨基丙基）碳二亚胺摩尔比为1：1～10；3,4-二羟基苯甲酸与1-羟基苯并三氮唑摩尔比为1：1～10；3,4-二羟基苯甲酸与三乙胺摩尔比为1：1～10；3,4-二羟基苯甲酸与L-亮氨酸甲酯盐酸盐摩尔比为1：1~5。

4.权利要求1所述的3,4-二羟基苯乙酰亮氨酸甲酯的制备方法,其特征在于：

步骤一，合成3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯

向3,4-二羟基苯乙酸的无水丙酮溶液中加入适量碳酸钾固体，再缓慢滴加硫酸二甲酯无水丙酮溶液，加热回流6小时，反应结束后，抽滤除去碳酸钾颗粒，蒸去丙酮后，残余物用乙酸乙酯溶解，洗涤，干燥，柱层析得3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯；

步骤二，合成3,4-二甲氧基苯乙酰亮氨酸甲酯

称取3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯于三口瓶中，加入二氯甲烷及30wt%的氢氧化钠水溶液，室温剧烈搅拌40分钟，停止反应，分离得到水层，调节水层pH值为2-3，萃取，干燥，蒸去乙酸乙酯得到白色粉末状固体；将其加入到二氯亚砜中，并滴加1滴DMF，加热回流3小时制得3,4-二甲氧基苯乙酰氯，用无水二氯甲烷溶解待用；

向L-亮氨酸甲酯盐酸盐无水二氯甲烷溶液中，滴加三乙胺溶液，搅拌反应后抽滤除去不溶盐，得L-亮氨酸甲酯的二氯甲烷滤液，再加入三乙胺溶液，在-20℃条件下，滴加新制的3,4-二甲氧基苯乙酰氯的二氯甲烷溶液，搅拌反应8小时；反应结束后，抽滤除去盐酸盐固体，滤液洗涤，干燥，蒸发二氯甲烷得残余物，用乙醚与二氯甲烷重结晶，制得3,4-二甲氧基苯乙酰亮氨酸甲酯；

步骤三，合成3,4-二羟基苯乙酰亮氨酸甲酯

在-30℃氮气保护条件下，向3，4-二甲氧基苯乙酰亮氨酸甲酯的无水二氯甲烷溶液中，缓慢滴加三溴化硼的二氯甲烷溶液，搅拌反应4小时；反应结束后，将溶液倒入冰水混合物中，剧烈搅拌，静置，用乙酸乙酯萃取，洗涤，干燥，柱层析得3,4-二羟基苯乙酰亮氨酸甲酯。

5.根据权利要求5所述的3,4-二羟基苯乙酰亮氨酸甲酯制备方法，其特征在于：

步骤一中，所述的3,4-二羟基苯甲酸与所述硫酸二甲酯的摩尔比为1：1～10；

步骤二中，每克3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯采用10ml 30%氢氧化钠水溶液；每克3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯采用2毫升二氯亚砜；3,4-二甲氧基苯乙酸甲酯与L-亮氨酸甲酯盐酸盐的摩尔比为1：1~5；

步骤三中，3，4-二甲氧基苯乙酰亮氨酸甲酯与三溴化硼的摩尔比为1：1～10。

6.权利要求1所述的L-亮氨酸衍生物在制备预防或治疗H₅N₁禽流感药物中的应用。

7.权利要求1所述的L-亮氨酸衍生物作为H₅N₁病毒进入抑制剂上的用途。