[发明专利]一种丹酚酸A纯化方法

权利要求书

1.一种丹酚酸A纯化方法，其特征在于：将含有丹酚酸A的洗脱液或提取液；采用如下步骤进一步纯化：

步骤一将所述洗脱液或提取液减压浓缩至每 1mL含丹酚酸Al-10mg，调pH至2.5～4.5，离心，上清液经非极性或弱极性大孔树脂柱层析分离，所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶(35～70)，树脂柱径高比为1∶(4～30)，用水洗脱后，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液；

步骤二将步骤一得到的洗脱液浓缩至每 mL含1-10mg丹酚酸A的溶液，用葡聚糖凝胶LH-20或ODS-C18或聚酰胺层析柱分离，所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1∶(5～25)，树脂柱径高比为1∶(4～25)，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液，洗脱液减压回收并浓缩成水溶液；

步骤三将步骤二得到的水溶液调pH至2.0～4.0，经有机溶剂萃取，分离有机溶剂相，所述的有机溶剂为叔丁基甲基醚、乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丁酯或甲酸乙酯；

步骤四将步骤三得到的溶液减压回收有机溶剂，制成每 1mL含丹酚酸A500～10000mg的萃取液，用硅胶层析柱分离，用洗脱剂洗脱，高效液相检测丹酚酸A，收集含有丹酚酸A的洗脱液，其中所述洗脱剂为石油醚、正戊烷、正庚烷、乙酸甲酯、甲酸乙酯、叔丁基甲基醚组成的两相溶剂；

步骤五将步骤四得到的洗脱液，减压回收洗脱剂，再加水溶解，微波真空干燥，所述微波真空干燥温度：20-100℃，回差温度1-5℃，真空度-0. 07MPa以上，微波功率1-100kW，干燥10-200分钟，得进一步纯化的丹酚酸A。

2.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述大孔树脂柱为HPD-80、HPD-100、HPD-100B、HPD-200A、HPD-300、HPD-450、HPD-722、HPD-826、ADS-5、ADS-8、ADS-21、D101或AB-8。

3.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述洗脱剂分别为水及不同比例的水与乙醇，并且先用水与10～40％乙醇洗脱，除去杂质，再用20～60％乙醇洗脱。

4.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤二中的所述洗脱剂分别为水及不同比例的水与乙醇，并且先用水、20～60％乙醇溶液洗脱除杂，再用40～9％乙醇溶液洗脱。

5.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一中所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶(45～55)，树脂柱径高比为1∶(8～18)。

6.根据权利要求5所述的纯化方法，其中步骤一中所述丹酚酸A上样量与大孔吸附树脂比为1∶50，树脂柱径高比为1∶10。

7.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤二中所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1∶(8～18)，树脂柱径高比为1∶(6～20)。

8.根据权利要求7所述的纯化方法，其中步骤二中所述丹酚酸A上样量与层析柱比为1∶10，树脂柱径高比为1∶8。

9.根据权利要求1所述的纯化方法，其中步骤一和步骤三中使用的pH调节剂为磷酸、盐酸、硫酸或醋酸。