[发明专利]一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法，属于海产品加工技术领域。

背景技术

随着鲟鱼人工繁殖和养殖技术的成功和推广，鲟鱼的养殖面积和养殖产量逐年递增。鲟鱼养殖的主要目的是生产具有黑色黄金之称的鲟鱼籽酱，除鲟鱼籽外，鲟鱼的其它部位也极具开发价值。鲟鱼除背部骨板外，通体均为软骨，软骨在鲟鱼各组织中占有较大的比重，该部位具有明显的抗癌和补钙作用，素有“鲨鱼翅、鲟鱼骨，食之明目壮阳，延年益寿”之说，这主要是因为鲟鱼软骨组织中含有大量的硫酸软骨素，据报道鲟鱼头、脊索、鳍中软骨的硫酸软骨素含量高达30%。

硫酸软骨素(Chondroitin sulfate，简称Chs)是动物软骨组织特有的天然酸性粘多糖,存在ChsA、ChsB、ChsC、ChsD和ChsE等多种异构体。它们均是由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰-D-氨基半乳糖交替连结而成的双糖聚合物，只是硫酸基团位置不同而已。近年来，随着对其生理功能和生化性质研究的深入,发现Chs具有抗凝、抗炎、抗血栓、抗癌及降低心肌耗氧量,促进冠状动脉循环、降血脂、抗凝血和防止血管硬化等作用；对冠心病、动脉粥样硬化、心绞痛、心肌缺氧、心肌梗塞等心血管疾病的治疗有一定疗效；还对神经细胞、粘膜细胞、肾细胞等具有保护作用；Chs还可活化脂解酶，使脂肪降解，因此是防止肥胖有效物质；Chs可与某些物质调制成化妆品用于保护皮肤的健美；Chs还具有保水性、保胶性和高粘性,我国出口到日本、韩国的Chs都被用作食品添加剂。因此Chs是国内外流行的保健品和化妆品以及医药品的重要原料。

传统的动物软骨组织中硫酸软骨素的提取方法多耗时长、提取工艺复杂，硫酸软骨素纯度低，不利于鲟鱼软骨组织中硫酸软骨素的产业化生产。因此研究鲟鱼软骨素的提取、纯化工艺，充分利用鲟鱼软骨资源，不但可以提高鲟鱼产品附加值，而且减少对环境的污染, 还可开发鲟鱼系列产品，对促进我国鲟鱼养殖业的进一步发展，使我国鲟鱼的养殖和加工形成良性循环是发展的必然趋势，对于提高鲟鱼的经济和社会价值具有不可估量的意义。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法，简化鲟鱼硫酸软骨素的纯化工艺，提高鲟鱼硫酸软骨素的提取得率及纯度，促进其经济效益的提升。

为实现上述目的，本发明提供了一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法，将鲟鱼软骨超微粉碎或干燥后粉碎，在超声波的辅助下进行酶法提取，所述超声辅助条件为频率35kHz，功率为280~360W，调节温度为40～50℃进行酶解20～50min，而后于95℃灭酶5min，于0～4℃下冷冻离心10min得上清液；再通过水解与沉淀同步处理后，经复溶除杂、干燥处理即得白色海绵状硫酸软骨素产品。 

所述的鲟鱼软骨前处理过程为：取鲟鱼软骨组织，于80℃-90℃水浴处理10～20min，去除表面的肌肉及脂肪等杂质，湿法超微粉碎或干燥粉碎粒径为80～120目。

所述的硫酸软骨提取过程为：软骨样品与磷酸盐缓冲溶液0.1M，pH6.5～7.0的比例为1:6～10（m/v），酶解所用酶为胰蛋白酶，其添加量为每克鲟鱼软骨样品加入1000~2000U。

水解和沉淀的具体步骤为将NaOH加入到无水乙醇溶液中，混匀预冷后缓慢加入到酶解所得的上清液中，水解和沉淀温度为常温，时间为30～40min。所述的水解和沉淀过程为：无水乙醇体积为上清液的0.8～1.4倍（V/V），NaOH浓度为0.4～0.8M。

所述的纯化处理过程为：将沉淀用2～3倍的水复溶，用40%的乙酸中和至中性，0～4℃离心，真空冷冻干燥即得白色海绵状硫酸软骨素产品。

采用本发明后可达到以下的效果：本发明在超声波辅助条件下进行酶解，促进软骨组织中蛋白质分解，有效将与之结合的硫酸软骨素释放出来，缩短提取时间；将碱解与沉淀步骤一步处理，缩短纯化时间，提高鲟鱼硫酸软骨素的提取得率；通过纯化步骤提高产品纯度。产品颜色为白色海绵状，产品得率为26～31%，纯度超过75%，最高可达81.3%。

具体实施方式

实施例1

本实施例提供的鲟鱼硫酸软骨素提取纯化方法，包括以下步骤：  1）样品前处理：取鲟鱼软骨组织，于80℃水浴处理20min，去除表面的肌肉及脂肪等杂质，湿法超微粉碎制成粒径为100目的湿样。