[发明专利]一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法

权利要求书

1.一种利用鲟鱼软骨制备硫酸软骨素的方法，其特征是：包括以下步骤：

(1) 鲟鱼软骨处理：将鲟鱼软骨湿法超微粉碎或干燥粉碎；

(2) 超声波酶解处理：将鲟鱼软骨溶于缓冲溶液中，加入胰蛋白酶，混匀，进行超声辅助酶解, 所述的超声酶解条件为频率35kHz，功率为280~360W，调节温度为40～50℃进行酶解20～50min；酶解完毕后于95℃灭酶5min，于0～4℃下冷冻离心10min取上清液；

(3)水解与沉淀同步处理:  将步骤2所得上清液用无水乙醇和NaOH混和溶液继续水解，离心得白色沉淀；

(4)纯化、干燥：将步骤3所得沉淀物用水复溶去除不溶性杂质，经冷冻干燥处理即得白色海绵状硫酸软骨素产品。

2.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(1)中对鲟鱼软骨进行前处理：将鲟鱼软骨于80℃～90℃水浴处理10～20min，去除表面的肌肉及脂肪。

3.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(1)中所述超微粉碎粒径为80～100目。

4.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(1)中所述干燥粉碎温度为40～50℃，粉碎粒径为80～120目。

5.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(2)中所述的缓冲溶液为磷酸盐缓冲溶液0.1M，pH6.5～7.0，软骨与缓冲溶液的质量/体积比例为1：6～10 m/v。

6.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(2)中所述的胰蛋白酶的添加量为每克鲟鱼软骨样品中加入1000~2000U。

7.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于步骤(3)中所述的无水乙醇和碱的加入过程为先将NaOH加入到无水乙醇中，混匀预冷后缓慢加入到步骤(2)所得的上清液中，水解和沉淀温度为室温，时间为30~40min。

8.根据权利要求1或7中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于：步骤(3)中所述的水解和沉淀所用无水乙醇体积为上清液的0.8～1.4倍（V/V），NaOH浓度为0.4～0.8M。

9.根据权利要求1中所述制备硫酸软骨素的方法，其特征在于：步骤(4)中所述的纯化处理过程为：将沉淀物用2～3倍的水复溶，用40%的乙酸中和至中性，0～4℃离心，真空冷冻干燥即得白色海绵状硫酸软骨素产品。