[发明专利]双峰驼乳铁蛋白基因、重组蛋白及其克隆方法

权利要求书

1.一种双峰驼乳铁蛋白基因，其特征在于该基因是一种控制转铁蛋白家族的非血红素铁结合性糖蛋白合成密切相关的基因，具有SEQ ID NO.1中从核苷酸第22-2104位的核苷酸序列，其核苷酸序列与单峰驼乳铁蛋白核苷酸序列AJ131674.1具有90%的相似性。

2.一种根据权利要求1所述的双峰驼乳铁蛋白基因的重组蛋白。

3.根据权利要求2所述的重组蛋白，其特征在于该重组蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO.1。

4.根据权利要求2或3所述的重组蛋白，其特征在于该重组蛋白为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列的多肽、或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

5.根据权利要求2或3所述的重组蛋白，其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

6.根据权利要求4所述的重组蛋白，其特征在于该重组蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.2。

7.根据权利要求2或3所述的重组蛋白，其特征在于通过设计一对引物从双峰驼乳铁蛋白中得到双峰驼乳铁蛋白基因，该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4，其序列信息如下：

SEQ ID NO.3：5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’，

SEQ ID NO.4：Oligo dT。

8.根据权利要求4所述的重组蛋白，其特征在于通过设计一对引物从双峰驼乳铁蛋白中得到双峰驼乳铁蛋白基因，该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4，其序列信息如下：

SEQ ID NO.3：5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’，

SEQ ID NO.4：Oligo dT。

9.根据权利要求5或6所述的重组蛋白，其特征在于通过设计一对引物从双峰驼乳铁蛋白中得到双峰驼乳铁蛋白基因，该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4，其序列信息如下：

SEQ ID NO.3：5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’，

SEQ ID NO.4：Oligo dT。

10.一种根据权利要求1所述的双峰驼乳铁蛋白基因的克隆方法，按下述步骤进行：第一步，组织分离(Isolation)；第二步，总RNA的分离(Total RNA isolation)，总RNA的分离(Total RNA isolation)包括提取RNA的准备工作、组织总RNA提取、组织总RNA的鉴定；第三步，全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA)，全长cDNA的克隆(Cloning of Full-length cDNA)包括引物设计及合成、RT-PCR扩增、克隆和测序，该引物对的核苷酸序列正向引物为SEQ ID NO.3和反向引物为SEQ ID NO.4，其序列信息如下：

SEQ ID NO.3：5’- ATGAAGCTCTTCTTCCCCGCC -3’，

SEQ ID NO.4：Oligo dT。