[发明专利]一种裸眼和荧光增强检测含巯基氨基酸荧光分子探针的合成及应用

权利要求书

1.本发明涉及一种裸眼及荧光增强检测含巯基氨基酸荧光分子探针的制备方法以及该荧光分子探针在检测含巯基氨基酸方面的应用，其特征是具有下列化学分子结构通式：

所述检测含巯基氨基酸的荧光探针以二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物为荧光团，硝基甲烷为巯基识别基团的化合物。其中：R₁，R₂，R₃，R₄为H原子或甲基，R₅为H，CN，I，Cl，Br，Me，OMe，OH的一种。

2.根据权利要求1所述的基于二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物的裸眼识别和荧光增强检测含巯基氨基酸的荧光分子探针，其特征是：R₁，R₂，R₃，R₄为甲基，R₅为H。

3.权利要求1或2所述的荧光分子探针的合成方法，其制备方法是：

1)将吡咯和芳香醛溶解在二氯甲烷中，加入三氟乙酸做催化剂，室温搅拌。将二氯二氰基苯醌溶于二氯甲烷中加入到上述反应体系中，之后将碱和三氟化硼乙醚一起加入到反应体系中，反应完成后，将反应液倒入水中二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析分离。得到产物即为二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物。

2)将N，N-二甲基甲酰胺和三氯氧磷在冰浴下混合，恢复到室温后，向反应液中滴加溶于1，2-二氯乙烷中的二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物，升温搅拌。反应完毕后，降至室温，倒入到碳酸氢钠溶液中进行中和，继续搅拌后用二氯甲烷进行萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析分离得到产品即为二氟化硼-二吡咯甲烷醛衍生物。

3)将二氟化硼-二吡咯甲烷醛衍生物和硝基甲烷溶于甲苯中，加入哌啶和醋酸，回流。反应完成后，降至室温，二氯甲烷萃取，无水硫酸钠干燥，柱层析分离得到产品即为探针化合物。

4.根据权利要求3所述的基于二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物的裸眼识别和荧光增强检测含巯基氨基酸的荧光分子探针合成方法，其特征在于：所述反应步骤1)中采用的吡咯包括2，4-二甲基吡咯，2，5-二甲基吡咯，1-甲基吡咯等。采用的芳香醛包括苯甲醛，对羟基苯甲醛，对氰基苯甲醛，对碘苯甲醛，对溴苯甲醛等芳香醛。

5.根据权利要求3所述的基于二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物的裸眼识别和荧光增强检测含巯基氨基酸的荧光分子探针合成方法，其特征在于所述反应步骤2)中采用的无机碱中和可以为碳酸钠，碳酸氢钠，氢氧化钠，碳酸钾等无机碱。

6.根据权利要求3所述的基于二氟化硼-二吡咯甲烷衍生物的裸眼识别和荧光增强检测含巯基氨基酸的荧光分子探针合成方法，其特征在于所述反应步骤3)中采用溶剂可以为甲苯，二甲苯，邻二甲苯，邻二氯苯的有机溶剂。

7.权利要求1或2所述的荧光分子探针的应用，用于裸眼或荧光增强检测巯基氨基酸。