[发明专利]灯盏细辛制剂中四种有效成分含量同时检测的方法

权利要求书

1.一种灯盏细辛制剂中4种有效成分含量同时检测的方法，其特征在于按以下步骤进行：

1）对照品溶液的制备：取绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花乙素对照品加甲醇溶解制成每ml含绿原酸2-60μg/ml、含咖啡酸3.1-93μg/ml、含1,3-O-二咖啡酰奎宁酸1.2-36μg/ml、含灯盏花乙素10-300μg/ml的对照品溶液，备用；

2）供试品溶液的制备：取1 mL或1g灯盏细辛制剂于10mL量瓶中，加入纯化水4ml，甲醇定容至刻度，摇匀，滤过，取滤液作为供试品溶液；

3）4种有效成分含量测定：分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10-20μL，注入液相色谱仪中，测定，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；

其中：液相色谱仪用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈或甲醇中的一种或几种为流动相A，0.05％-1.0%的甲酸或乙酸或磷酸中的一种或几种的水溶液为流动相B，按以下梯度洗脱：

时间0～10min，比例7％～9％A；

时间10～24min，比例8％～12％A；

时间24～37min，比例9％～16％A；

时间37～57min，比例10％～24％A；

时间57～60min，比例24％～7％A；

流速每分钟0.5-2mL；检测波长327nm；柱温30-40℃，绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花乙素的理论塔板数不低于5000，与其他峰的分离度应大于1.5。

2.根据权利要求1所述的灯盏细辛制剂中4种有效成分含量同时检测的方法，其特征在于1）步骤中取绿原酸、咖啡酸、1,3-O-二咖啡酰奎宁酸、灯盏花乙素对照品加甲醇溶解制成每ml含绿原酸12-25μg/ml、含咖啡酸15-30μg/ml、含1,3-O-二咖啡酰奎宁酸6-12μg/ml、含灯盏花乙素50-120μg/ml的对照品溶液，备用。