[发明专利]一种SPF蛋外源病毒的检验方法

说明书

技术领域

本发明涉及SPF蛋外源病毒的检验方法。

背景技术

SPF蛋（无特定病原体的蛋）作为一种特殊的生物原材料，不论是在病毒学、营养学、病理学研究，还是在生物制品生产、检验中，都是不可缺少的标准实验材料。SPF蛋质量的好坏直接关系到科学研究的成果和生物制品的质量。

目前检验SPF蛋的外源病毒的惯用方法是：先采集种鸡的血液，再分离出血清，检测血清中的抗原抗体，从而进行判断SPF鸡群是否感染外源病毒，进而确定SPF蛋的质量是否合格。

而目前的科研单位、生物制品厂家等SPF蛋应用对象往往因为生物安全问题无法直接接触到种鸡，更无法采集到种鸡的血液，间接造成SPF蛋的质量无法监控。而SPF蛋的生产厂家也不方便频繁进出SPF鸡舍采集种鸡血液，进而检验。故通过血清检验SPF蛋对SPF蛋应用对象（例如疫苗生产单位）不现实，甚至无法实现。

按照国家标准，SPF蛋需检测的19种病源是：鸡白痢沙门氏菌、副鸡嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、鸡毒支原体、滑液囊支原体、禽流感病毒、新城疫病毒传染性、传染性支气管炎病毒、传染性喉气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、淋巴白血病病毒、网状内皮增生症病毒、马立克氏病毒、鸡传染性贫血病毒、禽呼肠孤病毒、禽脑脊髓炎病毒、禽腺病毒Ⅲ群、禽腺病毒Ⅰ群、禽痘病毒。以上大部分病毒都能在鸡胚的尿囊液和卵黄里面分离出来。有些病毒甚至能导致细胞病变，或盲传过程中出现病变，有些病毒则会出现胚胎病变。在19中病源中，禽痘病毒是不经过蛋传播的，我们在做蛋的检验时可以不要检验，其他的病毒很多都是可以通过比较简单的办法排除，具体如下表格1。但是淋巴白血病病毒、网状内皮增生症病毒、鸡传染性贫血病毒、禽呼肠孤病毒、禽脑脊髓炎病毒这五种病毒不但可以经蛋传播，同时也是疫苗出厂前外源病毒检测的重点和难点，直接影响疫苗的安全性，用ELISA试剂盒检测以上这五种病毒是十分必要的。

表格1：

病原细菌分离血凝性鸡胚明显病变细胞病变禽腺病毒Ⅲ群 √  禽腺病毒Ⅲ群 √  鸡白痢沙门氏菌√   副鸡嗜血杆菌√√  多杀性巴氏杆菌√   鸡毒支原体√   滑液囊支原体√   禽流感病毒 √  新城疫病毒传染性 √  传染性支气管炎病毒 √  传染性喉气管炎病毒  √ 传染性法氏囊病病毒  √ 马立克氏病毒   √