[发明专利]GNRH（促性腺激素释放激素）肽衍生物

说明书

本申请是申请号为200780026537.3，申请日为2007年5月1日，发明名称为“GNRH（促性腺激素释放激素）肽衍生物”的中国专利申请的分案申请。

技术领域

本申请涉及用于药物的试剂、组合物和方法。特别地，本发明涉及与GnRH肽相关的试剂。

背景技术

在人类中至少存在两种形式的促性腺激素释放激素（GnRH）。虽然对GnRH II的生物学作用知之甚少，但是我们知道GnRH I是哺乳动物繁殖的神经内分泌控制的中心调节子。从下丘脑神经元释放的GnRH I与垂体前叶（anterior pituitary）中的它的特异性的、G蛋白偶联受体（GPCR）相结合，最终促进促性腺激素的合成和释放（Kaiser等人，1997；Millar等人，2004）。GnRH另外还对垂体外组织（extra-pituitary tissues）和几种类型的癌症，特别是生殖系统癌症具有效应。在这些肿瘤中已经发现了激素的mRNA和受体，在体外和体内已经表明GnRH对细胞生长的直接的抑制（Limonta等人，2003和Grundker等人，2002进行了综述）。对这个新型作用的研究是非常新的，产生了相反的数据收集。例如，在肿瘤细胞中发现两个不同的结合位点和药理学上不同的受体，这引起一些研究者建议第二种受体亚型（命名为II型，以与I型垂体受体相对）（Enomoto等人，2004；Grundker等人，2004；Neill等人，2004）。但是，虽然在一些灵长类中已经克隆了II型受体，但是在人类中还没有发现功能性替代亚型（Morgan等人，2003）。而且，在妇科癌症中发现的mRNA和cDNA对应于I型受体（Limonta等人，2003）。

GnRH调节其抗增殖作用的分子机制也是一个争论的问题。一些证据表明，不像垂体受体（其结合至Gq）（Grundker等人，2002；Limonta等人，2003），在肿瘤中表达的受体主要结合至Gi。其他待激活的多种细胞内途径已经被命名，包括生长因子作用的下调（通过生长因子及其受体表达的减少和磷酸化酪氨酸磷酸酶的激活）、Akt和60s核糖体磷酸化蛋白的抑制（分别抑制细胞生存和蛋白合成）和几个促有丝分裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinases，MAPK）的激活（Grundker 2001；Chen等人，2002Kim等人，2004b；Kimura等人，1999；Kraus等人，2004Tanaka等人，2003）。细胞生长调节之上的GnRH暴露的结果毫无疑问由细胞类型（规定细胞内的内容和类固醇激素对增殖的依赖性）、治疗体制和其他的（有时为未明的）因素决定。

GB 2,237,571A涉及促性腺激素释放激素类似物。Folkers等人（1985，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，82:1070-1074）涉及与促黄体化激素释放激素生物学等价的十肽。Millar等人（1989，J.Biol.Chem.，35:21007-21013）涉及脊椎动物促性腺激素释放激素的嵌合类似物。

以前已经将GnRH肽用于治疗增殖性失调（通过调节垂体腺的激素释放），例如癌症。但是，最近证明：抗增殖也是配体的一个内在特性，其能够优先激活特定的信号级联反应，该事件被称为配体诱导的选择性信号传导的事件（LISS）（Maudsley等人，2004；Millar&Pawson，2004）。这解释了被刻画为拮抗剂的配体是如何通过相同的受体进行对其他细胞类型细胞的细胞生长抑制，因为他们不激活垂体受体。迄今为止，鉴定出极少的具有这些特性的配体。

发明内容

本发明人确定了与细胞生长抑制相关的GnRH I和GnRH II肽的结构性要求并令人惊奇地发现，GnRH I和GnRH II肽的抗增殖活性可通过取代肽序列中的特定氨基酸残基来进行调节。

人类GnRH I的肽序列（使用氨基酸残基的三字符密码子进行显示）为：pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-Gly-Leu-Arg-Pro-Gly.NH₂。

人类GnRH II的肽序列（使用氨基酸残基的三字符密码子进行显示）为：pGlu-His-Trp-Ser-His-Gly-Trp-Tyr-Pro-Gly.NH₂。