[发明专利]一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法

权利要求书

1.一种从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：

1）将泡叶藻原料于40-60℃下浸泡提取在泡叶藻原料干藻重量6-10倍的稀盐酸溶液中1.3-4.8h，稀酸浸泡液待用，保留上层漂浮物；酸浸泡后的泡叶藻固体继续加入其体积3-6倍的水溶液，搅拌浸泡4-7h，收集水浸泡液，将稀酸浸泡和水浸泡液合并待用；

2）将上层漂浮物调节至pH5.5-6.5，在经过滤或高速离心，收集过滤液A；

将上述依次经稀酸和水浸泡后固态藻体采用纳米高压均质机进行细胞破碎，破碎后进行离心分离收集上清液B；

3）将上述合并液、过滤液A和上清液B混合均匀后进行超滤去除盐分，而后超滤浓缩至原料重量的1/2体积（V/W），浓缩液进行醇沉淀，沉淀物干燥，即为岩藻聚糖硫酸酯粗干品；

4）将上述岩藻聚糖硫酸酯粗干品加入其3-5倍重量的蒸馏水中进行溶解，溶解后通过装有DEAE-Sepharose F.F.的阴离子交换树脂柱进行洗脱，收集洗脱液透析后于55-65℃低温浓缩并冷冻干燥获得，即得到原藻重量1.5-2.3％的岩藻聚糖硫酸酯。

2.按权利要求1所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述泡叶藻原料为南非、智利、秘鲁的泡叶藻或大型巨藻的一种或多种。

3.按权利要求1所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述泡叶藻原料浸泡在浓度为0.08-0.28mol/L的稀盐酸溶液中。

4.按权利要求1所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述步骤2）收集固态藻体，使用美国NB纳米高压均质机在300-2300r/min的转速下对底层固态藻体进行细胞破碎，破碎后以O-1600rpm速度进行离心分离，收集上清液B。

5.按权利要求1所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述步骤3）合并提取液、过滤液A和上清液B混合均匀后，采用超滤技术去除盐分，获得10000-20000道尔顿的分级产物，而后进行超滤浓缩至原藻重量的1/2(V/W)；所得浓缩液加入到其2-5倍体积的95％乙醇中，在5℃放置过夜使沉淀完全，收集沉淀物以1000-4000r／min，离心20min，收集沉淀用85％乙醇洗涤。

6.按权利要求5所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述浓缩液加入到95％乙醇中，使浓缩液中的乙醇含量达到50-65％。

7.按权利要求1所述从泡叶藻中提取制备低分子岩藻聚糖硫酸酯的方法，其特征在于：所述步骤4）溶解后依次用岩藻聚糖硫酸酯粗品重量3-5倍的蒸馏水和1-2mol/L的氯化钠溶液作为洗脱液进行阴离子交换树脂柱洗脱，收集氯化钠洗脱液并用8-14KD的透析袋进行透析。