[发明专利]一种利用毕赤酵母表达系统异源表达活性膜蛋白的方法

权利要求书

1.一种重组表达双歧杆菌BB-12的肌球蛋白交叉反应（MCRA）抗原的方法，其特征在于在PichiaPink^TM表达系统中表达动物双歧杆菌BB-12的膜蛋白MCRA。

2.根据权利要求1所述的重组表达双歧杆菌BB-12的肌球蛋白交叉反应（MCRA）抗原的方法，其特征在于该方法还包括：以动物双歧杆菌BB-12基因组为模板，以5’-CCGGATATCATGGACACTAGGGCGCCGAAAGTCG-3’，5’-CGGGGTACCTCAGTGATGGTGATGGTGATGTTTCGCCGAATCATTCTCCCCCG-3’为引物，通过高保真PCR扩增的方法得到MCRA蛋白的编码基因。

3.根据权利要求2所述的重组表达双歧杆菌BB-12的肌球蛋白交叉反应（MCRA）抗原的方法，其特征在于该方法还包括：在得到MCRA蛋白的编码基因后，将编码基因与具有信号肽的载体pPinkα-HC连接得到pPinkα-HC-MCRA质粒，然后用pPinkα-HC-MCRA质粒转化PichiaPink^TM，转化成功的PichiaPink^TM菌表达动物双歧杆菌BB-12的膜蛋白MCRA。

4.一种重组表达双歧杆菌BB-12的肌球蛋白交叉反应（MCRA）抗原的质粒，其特征在于，该质粒为pPinkα-HC-MCRA。

5.一种重组表达双歧杆菌BB-12的肌球蛋白交叉反应（MCRA）抗原的宿主，其特征在于，该宿主为pPinkα-HC-MCRA质粒转化的PichiaPink^TM菌，其中的pPinkα-HC-MCRA质粒是将双歧杆菌BB-12的MCRA编码基因与具有信号肽的载体pPinkα-HC连接得到的。

6.双歧杆菌BB-12肌球蛋白交叉反应（MCRA）蛋白用于制备共轭亚油酸的用途。

7.权利要求4所述的质粒或权利要求5所述的宿主用于制备共轭亚油酸的用途。