[发明专利]磷脂爬行酶抑制剂在制备用于预防或抑制癌细胞生长药物中的应用

说明书

相关申请案的交叉引用 

本申请案主张2012年4月20日提出的申请号为13/452,515的美国专利申请案的优先权和权利，该案的说明书和揭示内容以全文引用的方式并入本文中。 

技术领域

本发明涉及磷脂爬行酶(PLSCR)抑制剂及其组成物在用于预防或抑制癌细胞生长中的应用，特别是其PLSCR蛋白有过量表达的癌症。本发明的PLSCR-抑制剂包括，具有降低细胞中PLSCR蛋白的含量及/或生物活性的化合物，例如专一性单株抗体、拮抗剂及核酸。 

背景技术

癌症是造成人类死亡及罹病的主要原因之一。治疗癌症的方法包括以手术切除肿瘤，以及进行化学疗法。这些治疗方式可成功治愈某些癌症患者，但是，有些已经治愈的患者常会出现癌症复发现象，而必需再接受进一步治疗。化学治疗通常是对细胞(例如增生细胞)具有毒性的非选择性药剂，此类药剂可有效杀死癌细胞，但也会杀死健康细胞，而造成许多有害的副作用。 

某些癌细胞会表达或过量表达特定的细胞组分，例如细胞表面蛋白，或表达不同于正常细胞的细胞组分。另一项可用于癌症治疗的策略是标靶癌细胞，例如使用可与表达或过量表达于癌细胞表面上的蛋白质结合的抗体或抗体片段。已经有许多此类特异蛋白被鉴定出来。 

在此类蛋白质中，磷脂爬行酶是一种负责将细胞膜的脂质双层中的磷脂质进行互相转位(translocation)的蛋白质。人类磷脂爬行酶(PLSCR)是由命名为hPLSCR1-hPLSCR4的同源蛋白质家族所构成。爬行酶(Scramblases)是一群已知称作翻转酶(flippases)的穿膜脂质转运蛋白家族的成员。磷脂爬行酶中被研究最多的成员为磷脂爬行酶1(PLSCR1;UniProt accession No.O15162)(蛋白质分子量为37kDa)，其涉及将细胞膜磷脂质进行快速的Ca²⁺依赖性跨膜再分布(transbilayerredistribution)。最近，对于PLSCR1的功能，除了之前所发现作为磷脂质转位蛋 白的功能外，且有证据显示PLSCR1可作用为信息传递分子。已显示PLSCR1涉及蛋白质磷酸化作用，且当干扰素与其他细胞激素（cytokines）作用时，将可以活化基因的表现(Santosh,KS等人,Archives of Biochemistry and Biophysics462:103-114,2007)。在受病毒感染所诱发的干扰素反应，将会刺激PLSCR1的表达量升高，显示其参与细胞免疫反应。而且，所刺激的PLSCR1的表达，是分布于细胞核，以及其会与IP3R1基因的启动子结合并诱导其表达，显示PLSCR1蛋白在细胞分化作用上具有重要的功能。 

利用组织微列阵分析PLSCR1于多种肿瘤组织及正常组织中的表达，发现PLSCR1蛋白于许多肿瘤组织，例如胰脏腺细胞癌、甲状腺髓质癌、食道鳞状细胞癌、食道腺细胞癌、结肠腺癌、子宫颈鳞状细胞癌、膀胱移行性细胞癌；及于正常肝脏与正常肾上腺组织中有高度表达(参见图7)。因此，本发明研发出PLSCR1-抑制方法(例如，抗体、拮抗剂与siRNA)，并研究其用于抑制癌细胞生长的有效性。 

发明内容

本发明是基于先前发现PLSCR1在大肠直肠癌肿瘤组织中有高度表达(Han,C.L.等人,Molecular & Cellular Proteomics.10:10.1074/mcp.M110.003087,1-15,2011；Kuo,Y.B.等人,Molecular Medicine.17(1-2):41-47,2011)，以及最新的研究发现PLSCR-抑制方法(例如抗人类PLSCR的单株抗体)能抑制癌细胞增生及恶性肿瘤形成(neoplastic transformation)。 

于一方面，本发明是关于一种磷脂爬行酶(PLSCR)抑制剂在制备用于预防或抑制癌细胞生长药物中的应用，用于预防及/或抑制癌细胞生长。于本发明的一个具体实施例中，用于该方法的PLSCR-抑制剂能够降低PLSCR的生物活性。此类抑制剂包括PLSCR-特异性配位体，例如单株抗体及拮抗剂。 

于本发明的具体实施例中，所述的PLSCR-抑制剂可抑制所有PLSCR家族蛋白及PLSCR变异型的活性。PLSCR蛋白的家族成员包括PLSCR1、PLSCR2、PLSCR3与PLSCR4。